乙型肝炎病毒(HBV)可引發(fā)慢性肝炎、肝硬化等疾病,乙型肝炎病毒調(diào)節(jié)蛋白HBx對(duì)HBV復(fù)制有重要作用。圖1表示在PCR過(guò)程中HBx基因與引物的關(guān)系,圖2表示利用中國(guó)倉(cāng)鼠生產(chǎn)乙肝病毒HBx蛋白流程圖?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增圖1中HBx基因時(shí),在第33次循環(huán)結(jié)束后即可出現(xiàn)兩條鏈等長(zhǎng)的目的基因片段。圖2中②過(guò)程需要用到限制酶和DNA連接酶,兩種酶作用的化學(xué)鍵相同相同(填“相同”或“不相同”)。
(2)基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用顯微注射顯微注射法,檢測(cè)HBx基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA時(shí),需要用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段做探針,再與相應(yīng)的物質(zhì)雜交。
(3)④過(guò)程體外受精前需要對(duì)精子進(jìn)行獲能獲能處理,卵母細(xì)胞需要發(fā)育到MⅡ中MⅡ中期,才具備與精子受精的能力。⑤過(guò)程將獲得的早期胚胎移植到經(jīng)過(guò)同期發(fā)情同期發(fā)情處理的受體倉(cāng)鼠子宮內(nèi)。
(4)在⑤步驟操作前對(duì)胚胎進(jìn)行了檢查和篩選,發(fā)現(xiàn)有些胚胎因?yàn)橥庠椿虻牟迦攵劳鐾庠椿虿迦雽?dǎo)致胚胎死亡的原因可能是外源基因的插入導(dǎo)致胚胎正常發(fā)育所需的基因不能表達(dá)外源基因的插入導(dǎo)致胚胎正常發(fā)育所需的基因不能表達(dá)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】3;相同;顯微注射;放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段;獲能;MⅡ中;同期發(fā)情;外源基因的插入導(dǎo)致胚胎正常發(fā)育所需的基因不能表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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