人絨毛膜促性腺激素(HCG)是妊娠后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白,制備抗HCG單克隆抗體可檢測早孕。圖甲是抗HCG單克隆抗體的制備流程示意圖,其中X、Y表示細胞,a—f表示過程。圖乙是醫(yī)學上定量檢測抗原的雙抗體夾心法原理示意圖,單克隆抗體可以增強該方法的效果?;卮鹣铝袉栴}:
(1)a過程中培養(yǎng)的Y細胞是
骨髓瘤細胞
骨髓瘤細胞
,培養(yǎng)該細胞所需的氣體環(huán)境是 95%的空氣和5%的CO2
95%的空氣和5%的CO2
。保持培養(yǎng)環(huán)境處于無菌無毒條件的操作包括 培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌;定期更換培養(yǎng)液;添加一定量抗生素
培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌;定期更換培養(yǎng)液;添加一定量抗生素
(答兩點)。
(2)e過程表示體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,常向培養(yǎng)基中加入動物血漿等,原因是 人們對細胞所需的營養(yǎng)物質尚未全部研究清楚
人們對細胞所需的營養(yǎng)物質尚未全部研究清楚
。
(3)結合圖示分析,用雙抗體夾心法檢測抗原數(shù)量時,酶標抗體的作用是 與待測抗原結合,并催化檢測底物生成產(chǎn)物
與待測抗原結合,并催化檢測底物生成產(chǎn)物
,該方法中抗原至少需要含有 2
2
個抗體結合位點?,F(xiàn)有多種抗HCG的單克隆抗體,欲篩選出兩種適用于雙抗體夾心法的單克隆抗體,可通過檢測并比較產(chǎn)物量來確定。
(4)如果某技術操作中需要培養(yǎng)小鼠的體細胞,當細胞貼著片狀載體生長到表面相互接觸時,細胞停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為 接觸抑制
接觸抑制
。若要繼續(xù)傳代培養(yǎng),常用 胰蛋白酶或膠原蛋白酶
胰蛋白酶或膠原蛋白酶
進行處理。