噬菌體展示技術(shù)是將外源目標(biāo)基因插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當(dāng)位置,使目標(biāo)蛋白被展示到噬菌體表面的生物技術(shù)(如圖所示)。被展示的蛋白質(zhì)可以保持相對(duì)獨(dú)立的空間結(jié)構(gòu)和生物活性,以利于靶分子的識(shí)別和結(jié)合。請(qǐng)分析回答:
(1)插入載體之前,目標(biāo)基因一般需經(jīng)PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增基因的原理是 DNA的半保留復(fù)制DNA的半保留復(fù)制。若目標(biāo)基因的核苷酸序列未知,但已知其臨近區(qū)域的上、下游的部分序列如下所示,請(qǐng)從表中所列引物中選出一對(duì)合適的引物用于目標(biāo)基因的PCR擴(kuò)增:乙和C乙和C。
5′-GACGCATTACGGTAAC??????TCCAGCTTAGCAGTAA-3′
3′-CTGCGTAATGCCATTG??????AGGTCGAATCGTCATT-5′
引物Ⅰ | 引物Ⅱ | ||
甲 | 5′-CTGCGTAATGCCATTG | A | 5′-AGGTCGAATCGTCATT |
乙 | 5′-GACGCATTACGGTAAC | B | 5′-TCCAGCTTAGCAGTAA |
丙 | 5′-GTTACCGTAATGCGTC | C | 5′-TTACTGCTAAGCTGGA |
丁 | 5′-CAATGGCATTACGCAG | D | 5′-AATGACGATTCGACCT |
它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu)
它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu)
;建立噬菌體展示庫(kù)需用的工具酶有 限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
。(3)目標(biāo)蛋白的篩選利用了
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
方法,其原理是 抗體的結(jié)合具有特異性
抗體的結(jié)合具有特異性
。(4)擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí),進(jìn)行誘變處理的目的可能是通過(guò)提高某些基因的突變率而獲取
具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體
具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體
;根據(jù)噬菌體的特征,擴(kuò)大培養(yǎng)體系中必須含有 宿主細(xì)胞
宿主細(xì)胞
,噬菌體才能繁殖。多次篩選后,目標(biāo)基因高效表達(dá)
目標(biāo)基因高效表達(dá)
的噬菌體得到高度富集。【考點(diǎn)】噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn);目的基因的篩選與獲取.
【答案】DNA的半保留復(fù)制;乙和C;它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu);限制酶和DNA連接酶;抗原—抗體雜交;抗體的結(jié)合具有特異性;具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體;宿主細(xì)胞;目標(biāo)基因高效表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
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1.1952年,赫爾希和蔡斯用同位素標(biāo)記法研究了T2噬菌體的DNA和蛋白質(zhì)在侵染大腸桿菌過(guò)程中的功能。如圖甲表示T2噬菌體某些基因表達(dá)的部分過(guò)程,圖乙為圖甲中④部分的放大。請(qǐng)回答:
(1)圖甲所示過(guò)程中新形成的化學(xué)鍵有
(2)圖乙中各物質(zhì)或結(jié)構(gòu)含有核糖的有
(3)若用32P和35S共同標(biāo)記的T2噬菌體侵染未被標(biāo)記的大腸桿菌,則子代噬菌體的蛋白質(zhì)標(biāo)記情況是
(4)大腸桿菌細(xì)胞中的RNA,其功能有
A.傳遞遺傳信息
B.作為遺傳物質(zhì)
C.轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸
D.構(gòu)成核糖體
(5)地球上幾乎所有的生物體都共用一套遺傳密碼,密碼子是指發(fā)布:2024/12/23 8:0:2組卷:12引用:1難度:0.6 -
2.用T2噬菌體分別侵染培養(yǎng)在含32P或35S培養(yǎng)基上的兩組大腸桿菌,大腸桿菌裂解后,收集裂解液,再分別感染培養(yǎng)在普通培養(yǎng)基上的甲、乙兩組大腸桿菌,感染后培養(yǎng)10min,再攪拌離心,得到上清液(內(nèi)有噬菌體)和沉淀(大腸桿菌,未破裂),同位素測(cè)定結(jié)果如下表。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是( ?。?br />
離心管 放射強(qiáng)度/% 上清液 沉淀 甲組 30 70 乙組 80 20 A.噬菌體的DNA可侵入到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi) B.甲組上清液中含有尚未完成侵染的噬菌體 C.乙組沉淀中部分大腸桿菌帶有噬菌體外殼 D.甲、乙兩組的對(duì)照說(shuō)明DNA是大腸桿菌的遺傳物質(zhì) 發(fā)布:2024/12/17 18:0:1組卷:15引用:3難度:0.6 -
3.某研究小組重溫了“噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)”,其中32P標(biāo)記組的部分實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示。下列敘述不正確的是( ?。?/h2>
A.甲培養(yǎng)液攪拌離心后,需取上清液轉(zhuǎn)移至乙培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng) B.乙培養(yǎng)液攪拌離心后,沉淀物的放射性高于上清液,甲組則相反 C.甲培養(yǎng)液中的子代噬菌體含32P,乙培養(yǎng)液中的子代噬菌體不含32P D.與甲相比,乙所需的培養(yǎng)時(shí)間更短 發(fā)布:2024/12/17 20:30:1組卷:5引用:2難度:0.7
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