干燥綜合征(SS)是臨床常見的一種自身免疫病,其血清中存在多種抗體,其中以SSB抗體特異性最強,影響最顯著??蒲腥藛T為建立抗SSB抗體全自動定量檢測的磁微?;瘜W發(fā)光試劑,利用基因工程技術獲得重組SSB蛋白,流程如下,請分析回答:
(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要 逆轉錄逆轉錄酶。通過PCR技術擴增SSB基因的前提是要有 一段已知的SSB基因的核苷酸序列一段已知的SSB基因的核苷酸序列,以便合成引物。為與PET41a質粒連接,獲得的目的基因A兩端要含有 BamHⅠ和XhoⅠBamHⅠ和XhoⅠ酶切位點。
(2)獲得含SSB基因的重組質粒后,進行如下實驗切割原質粒和重組質粒,獲得片段大小如下表(1kb=1000堿基對)(注意:DNA片段大小與圖中所畫比例一致)
限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ和XhoⅠ |
原質粒 | 8.1kb | 2.7kb、5.4kb |
重組質粒 | 3.4kb、5.0kb | 未做該處理 |
3kb
3kb
。與人基因組文庫中的SSB基因相比,通過①過程獲得的SSB基因結構特點是 沒有啟動子和內含子
沒有啟動子和內含子
。(3)②過程目的是將重組質粒轉染到處于
感受態(tài)
感受態(tài)
的大腸桿菌內,并接種于添加 卡那霉素
卡那霉素
的培養(yǎng)基上,收集菌落進行鑒定,將陽性菌落進一步純化后將菌體破碎處理,篩選得到重組SSB蛋白。(4)為檢測重組質粒表達情況及重組蛋白與抗體結合能力,科研人員用含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑連續(xù)三次免疫雌性小鼠,第三次免疫后第7天取小鼠血清并提取抗體并進行檢測,結果表明重組SSB蛋白具有與相應抗體高度結合的能力。對小鼠進行連續(xù)三次免疫的目的是
使小鼠體內產(chǎn)生更多的記憶細胞和抗體
使小鼠體內產(chǎn)生更多的記憶細胞和抗體
。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】逆轉錄;一段已知的SSB基因的核苷酸序列;BamHⅠ和XhoⅠ;3kb;沒有啟動子和內含子;感受態(tài);卡那霉素;使小鼠體內產(chǎn)生更多的記憶細胞和抗體
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:5引用:1難度:0.6
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1.下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是( ?。?/h2>
A.DNA連接酶具有特異性,只能連接同一種限制性核酸內切酶切割形成的黏性末端 B.若能在植物細胞中檢測到相應的目的基因,則說明基因工程項目獲得成功 C.蛋白質工程需構建基因表達載體,改造后的蛋白質的性狀可遺傳給后代 D.將抗蟲基因整合到某植物的線粒體DNA中,可通過花粉傳播,從而引起基因污染 發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.下列有關基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>
A.質粒上標記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選 B.目的基因必須整合到受體細胞的DNA中才能復制 C.構建表達載體時需要在目的基因前加上起始密碼子 D.誘變育種和基因工程的原理相同 發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7 -
3.幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內,可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
(2)生物體細胞內的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉基因植株(幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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