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人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值??蒲腥藛T通過(guò)生物工程技術(shù)獲得轉(zhuǎn)HSA 基因奶牛,并通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)HSA,其主要技術(shù)流程如圖1所示。請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)圖1中為獲取大量的去核卵母細(xì)胞,往往需對(duì)相應(yīng)母牛使用
促性腺激素
促性腺激素
處理,使其超數(shù)排卵,收集并選取處在
減數(shù)第二次分裂中期
減數(shù)第二次分裂中期
時(shí)期的卵母細(xì)胞,通過(guò)顯微操作去除細(xì)胞核。供核的牛胎兒成纖維細(xì)胞通常選用傳代 10 代以內(nèi)的細(xì)胞,其原因是
(10 代以內(nèi)的細(xì)胞)能保持正常的二倍體核型
(10 代以內(nèi)的細(xì)胞)能保持正常的二倍體核型
。
(2)胚胎移植時(shí),為使代孕母牛能處于適合的生理狀態(tài),需要用激素對(duì)其進(jìn)行
同期發(fā)情
同期發(fā)情
處理。為獲得更多轉(zhuǎn)基因母牛,可在胚胎移植前對(duì)胚胎進(jìn)行
分割
分割
。
(3)SRY-PCR法性別鑒定的基本程序是:提取牛胎兒成纖維細(xì)胞的DNA,經(jīng)PCR 反應(yīng)體系擴(kuò)增SRY基因(Y 染色體上特有的性別決定基因)片段,然后對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)。
①PCR反應(yīng)體系中通常含有模板DNA、引物、Taq酶、
dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)
dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)
、緩沖液等。根據(jù)SRY基因序列設(shè)計(jì)的引物長(zhǎng)度一般為20~24個(gè)核苷酸,其不宜過(guò)短的原因主要是
防止引物隨機(jī)結(jié)合(或引物的特異性差)
防止引物隨機(jī)結(jié)合(或引物的特異性差)
,兩種引物中G+C的含量相差不宜過(guò)大,原因主要是
G+C的含量差別過(guò)大,低溫復(fù)性溫度難于統(tǒng)一
G+C的含量差別過(guò)大,低溫復(fù)性溫度難于統(tǒng)一
。
②PCR 一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為變性、
復(fù)性
復(fù)性
和延伸三步。在循環(huán)之前,常要進(jìn)行一次預(yù)變性,其目的是
以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率
以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率
。
③細(xì)胞核內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程如圖2 所示,其中有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰拿撗鹾塑账徭溒危ǚQ為岡崎片段),再形成較長(zhǎng)的分子,而在PCR過(guò)程中無(wú)岡崎片段形成的原因是
DNA子鏈的延長(zhǎng)方向只能是5'→3',細(xì)胞內(nèi)是邊解旋邊復(fù)制,PCR中復(fù)制過(guò)程是先完全解旋再?gòu)?fù)制
DNA子鏈的延長(zhǎng)方向只能是5'→3',細(xì)胞內(nèi)是邊解旋邊復(fù)制,PCR中復(fù)制過(guò)程是先完全解旋再?gòu)?fù)制
。
④若擴(kuò)增產(chǎn)物含大量SRY基因片段,則該種牛胎兒成纖維細(xì)胞
不能
不能
(填“能”或“不能”)用作技術(shù)流程中轉(zhuǎn)化過(guò)程的受體細(xì)胞。

【答案】促性腺激素;減數(shù)第二次分裂中期;(10 代以內(nèi)的細(xì)胞)能保持正常的二倍體核型;同期發(fā)情;分割;dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP);防止引物隨機(jī)結(jié)合(或引物的特異性差);G+C的含量差別過(guò)大,低溫復(fù)性溫度難于統(tǒng)一;復(fù)性;以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率;DNA子鏈的延長(zhǎng)方向只能是5'→3',細(xì)胞內(nèi)是邊解旋邊復(fù)制,PCR中復(fù)制過(guò)程是先完全解旋再?gòu)?fù)制;不能
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:57引用:2難度:0.6
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    反應(yīng)以阻止多精入卵,受精完成的標(biāo)志是
     
    。
    (2)為了某些需要,需對(duì)胚胎的性別進(jìn)行鑒定。目前最有效最準(zhǔn)確的方法是SRY-PCR法,操作的基本程序是:從被測(cè)的囊胚中取出幾個(gè)
     
    (填“滋養(yǎng)層”或“內(nèi)細(xì)胞團(tuán)”)細(xì)胞,提取DNA;然后用位于Y染色體上的性別決定基因(即SRY基因)的一段堿基作
     
    ,以
     
    為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增;最后與SRY特異性探針出現(xiàn)陰性反應(yīng)者,胚胎為
     
    性。
    (3)設(shè)計(jì)試管嬰兒、克隆人等都是引起人們廣泛爭(zhēng)論的問(wèn)題。我國(guó)不反對(duì)治療性克隆,即可利用人體細(xì)胞核移植等技術(shù)治療人類疾病,在去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核時(shí),可用微型吸管把位于
     
     
    之間的第一極體一并吸出。

    發(fā)布:2024/11/5 8:0:2組卷:57引用:1難度:0.8
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