中科院動(dòng)物研究所利用CRISPR/Cas9技術(shù),向豬的基因組內(nèi)插入一個(gè)解耦聯(lián)蛋白基因(UCP1)經(jīng)過(guò)基因改造的豬瘦肉率高、脂肪少、抗寒能力強(qiáng)。如圖是基因改造過(guò)程中涉及的相關(guān)限制酶及酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)圖中的抗生素抗性基因的作用是作為 標(biāo)記標(biāo)記基因,以便于篩選。為了獲取重組質(zhì)粒,除了使用限制酶外,還需使用 DNA連接DNA連接酶。
(2)重組質(zhì)粒上應(yīng)有 RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動(dòng)解耦聯(lián)蛋白基因(UCP1)轉(zhuǎn)錄,該部位稱(chēng)為 啟動(dòng)子啟動(dòng)子。
(3)在構(gòu)建基因表達(dá)載體過(guò)程中,為避免出現(xiàn)質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化,常用 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)切割質(zhì)粒和UCP1基因。
(4)獲得目的基因后,常采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,在此過(guò)程中,由于DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA單鏈,只能從 3′3′端延伸DNA單鏈,因此需要加入引物。
(5)科研人員通過(guò) 顯微注射顯微注射法,將基因表達(dá)載體導(dǎo)入豬的受精卵中??赏ㄟ^(guò) DNA分子雜交DNA分子雜交技術(shù),來(lái)檢測(cè)UCP1基因是否已導(dǎo)入到豬受精卵細(xì)胞。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】標(biāo)記;DNA連接;RNA聚合酶;啟動(dòng)子;BamHⅠ和HindⅢ;3′;顯微注射;DNA分子雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/5/23 20:38:36組卷:22引用:4難度:0.7
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1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( )
A.DNA連接酶具有特異性,只能連接同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割形成的黏性末端 B.若能在植物細(xì)胞中檢測(cè)到相應(yīng)的目的基因,則說(shuō)明基因工程項(xiàng)目獲得成功 C.蛋白質(zhì)工程需構(gòu)建基因表達(dá)載體,改造后的蛋白質(zhì)的性狀可遺傳給后代 D.將抗蟲(chóng)基因整合到某植物的線粒體DNA中,可通過(guò)花粉傳播,從而引起基因污染 發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
(4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6 -
3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>
A.質(zhì)粒上標(biāo)記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選 B.目的基因必須整合到受體細(xì)胞的DNA中才能復(fù)制 C.構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需要在目的基因前加上起始密碼子 D.誘變育種和基因工程的原理相同 發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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