動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能?,F(xiàn)在已經(jīng)廣泛應(yīng)用于多種研究工作中,特別是新發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù),為制備單克隆抗體開辟了新途徑。研究表明DNA合成有兩條途徑:“S途徑”和“D途徑”,B淋巴細(xì)胞有“S途徑”和“D途徑”;骨髓瘤細(xì)胞只有“D途徑”;HAT培養(yǎng)基中氨基蝶呤可以阻斷DNA合成的“D途徑”。如圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖?;卮鹣铝袉栴}:
(1)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是制備單克隆抗體的基礎(chǔ)。
(2)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是 特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備。
(3)雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的 在體外大量增殖(無限增殖)在體外大量增殖(無限增殖)特點(diǎn),又具備淋巴細(xì)胞的 分泌特異性抗體分泌特異性抗體特點(diǎn)。
(4)圖示用HAT培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞的過程中,融合的淋巴細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)在HAT培養(yǎng)基上不生長的原因是 缺乏在體外培養(yǎng)基中增殖的能力缺乏在體外培養(yǎng)基中增殖的能力,融合的骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中不生長的原因是 其DNA合成途徑被氨基蝶呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制其DNA合成途徑被氨基蝶呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制。
(5)若在體外大規(guī)模培養(yǎng)該雜交瘤細(xì)胞,需要采取一定的措施保證被培養(yǎng)細(xì)胞處于無菌無毒的環(huán)境中,如向培養(yǎng)液中加一定量的 抗生素抗生素,及時(shí)更換培養(yǎng)液等;為保證足夠的營養(yǎng),通常需加入 動(dòng)物血清動(dòng)物血清等一些天然成分,還需提供一定濃度的 CO2CO2,以維持培養(yǎng)液適宜的pH。若是將動(dòng)物組織分解成單個(gè)細(xì)胞形成細(xì)胞懸液,還需要用 胰蛋白酶或膠原蛋白胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】動(dòng)物細(xì)胞融合;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng);特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備;在體外大量增殖(無限增殖);分泌特異性抗體;缺乏在體外培養(yǎng)基中增殖的能力;其DNA合成途徑被氨基蝶呤阻斷而不能進(jìn)行DNA復(fù)制;抗生素;動(dòng)物血清;CO2;胰蛋白酶或膠原蛋白
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:16引用:1難度:0.7
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( ?。?br />
A.多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多已免疫的T淋巴細(xì)胞 B.經(jīng)選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)可得到既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47抗體的雜交瘤細(xì)胞 C.實(shí)驗(yàn)組中巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系需放入CO2培養(yǎng)箱 D.對(duì)照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于實(shí)驗(yàn)組可驗(yàn)證上述推測(cè) 發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請(qǐng)分析回答下列問題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長春堿相比,將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5 -
3.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />
A.單克隆抗體制備過程中需要使用Taq酶 B.ADC進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的運(yùn)輸方式為協(xié)助擴(kuò)散 C.溶酶體破裂導(dǎo)致其中的水解酶釋放,加速了腫瘤細(xì)胞死亡 D.細(xì)胞毒素具有與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的能力 發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7