當(dāng)前位置： 2020年浙江省金華市十校高考生物模擬試卷（4月份）> 試題詳情

腺病毒能引起人呼吸系統(tǒng)不適等癥狀，但致死率低。研究發(fā)現(xiàn)該病毒可作為基因工程的載體。陳薇等科學(xué)家研發(fā)了以人5型腺病毒（Ad5）為載體的重組新冠疫苗，這是國(guó)內(nèi)第一個(gè)進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的新冠疫苗。腺病毒載體疫苗生產(chǎn)過(guò)程示意圖如下：

回答下列問(wèn)題：
（1）在制備人腎上皮細(xì)胞系（293細(xì)胞）時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)一段時(shí)間，細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)瓶后不再分裂，這種現(xiàn)象稱為
接觸抑制
接觸抑制
。出現(xiàn)此現(xiàn)象后，需用
胰蛋白酶
胰蛋白酶
處理，得到細(xì)胞懸液，再進(jìn)行
傳代
傳代
培養(yǎng)，以獲得更多的293細(xì)胞。
（2）新冠病毒為RNA病毒，其遺傳物質(zhì)不能直接拼接到質(zhì)粒上，因此在制備以上疫苗時(shí)需先通過(guò)
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
過(guò)程獲得相應(yīng)的DNA．構(gòu)建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒，可使用雙酶切法，使之產(chǎn)生
不同
不同
的粘性末端以提高目的基因與質(zhì)粒重組的成功率。據(jù)圖可知需將
重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒
重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒
導(dǎo)入293細(xì)胞，從而獲得轉(zhuǎn)基因腺病毒。
（3）檢測(cè)轉(zhuǎn)基因腺病毒攜帶的目的基因是否在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，可檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)是否含有相應(yīng)的
mRNA
mRNA
或抗原分子，若檢測(cè)抗原分子可用
單克隆抗體制備
單克隆抗體制備
技術(shù)獲得特異性探針。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．

【答案】接觸抑制；胰蛋白酶；傳代；逆轉(zhuǎn)錄；不同；重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒；mRNA；單克隆抗體制備

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：19引用：1難度：0.6

相似題

1．番茄含有豐富的維生素，但不耐寒?？茖W(xué)家將魚(yú)的抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞，并進(jìn)行組織培養(yǎng)得到轉(zhuǎn)基因番茄植株，并將該植株種植在寒冷環(huán)境中，發(fā)現(xiàn)番茄植株并無(wú)抗寒性狀。為了找出不抗寒的原因，科學(xué)家提取轉(zhuǎn)基因番茄細(xì)胞中的有關(guān)成分進(jìn)行了如下分析?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）提取細(xì)胞中的

，采用抗原―抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，若能檢測(cè)到抗凍蛋白，但含量非常少，其原因可能是

。魚(yú)的抗凍蛋白基因能在番茄細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)的理論基礎(chǔ)是

。
（2）若經(jīng)上一步檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白，可采用分子雜交技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中的RNA和DNA。該技術(shù)依據(jù)的原理是

，檢測(cè)過(guò)程中需使用DNA探針進(jìn)行檢測(cè)，若出現(xiàn)DNA―RNA的雜交帶，說(shuō)明

，則可能是

導(dǎo)致無(wú)抗凍蛋白。
（3）若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白的mRNA，使用DNA探針對(duì)細(xì)胞內(nèi)的基因組DNA進(jìn)行檢測(cè)，若出現(xiàn)DNA―DNA的雜交帶，說(shuō)明

，則可能是抗凍蛋白基因反向插入質(zhì)粒中導(dǎo)致抗凍蛋白基因無(wú)法正常表達(dá)。若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)抗凍蛋白基因，說(shuō)明在轉(zhuǎn)化過(guò)程中，可能導(dǎo)入番茄細(xì)胞的是

（填“普通質(zhì)?！被颉爸亟M質(zhì)?！保?。
發(fā)布：2024/11/8 11:0:1組卷：5引用：1難度：0.5
解析

2．為探究AtCA2ox8基因在擬南芥中的生物學(xué)功能，研究者采用PCR技術(shù)從擬南芥基因組中擴(kuò)增得到了該基因，并采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將該基因?qū)霐M南芥細(xì)胞中，得到了AtGA2ox8基因高表達(dá)的純合轉(zhuǎn)基因擬南芥植株，該植株表現(xiàn)為發(fā)育遲緩。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（　?。?/h2>

A．利用PCR擴(kuò)增AtGA2ox8基因時(shí)，循環(huán)n次需要消耗引物2ⁿ個(gè)

B．將AtGA2ox8基因?qū)胧荏w細(xì)胞前需要先構(gòu)建基因表達(dá)載體

C．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因擬南芥的過(guò)程中至少要進(jìn)行兩次篩選

D．若AtGA2ox8基因的序列已知，還可通過(guò)人工合成的方法獲取該基因

發(fā)布：2024/11/8 22:30:1組卷：17引用：1難度：0.7

解析

3．CAR-T療法僅僅靠打針就能殺死癌細(xì)胞，一時(shí)間讓國(guó)內(nèi)醫(yī)藥圈為之沸騰。CAR-T療法的全稱是嵌合抗原受體T細(xì)胞療法，CAR-T療法的操作步驟是：①直接采取患者的外周血，分離出其中的T淋巴細(xì)胞；②將分離的T淋巴細(xì)胞在體外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)改造，裝載上具有識(shí)別腫瘤抗原的受體及其刺激分子，形成CAR-T細(xì)胞；③將CAR-T細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng)，大量擴(kuò)增讓其數(shù)量成倍增加；④體外擴(kuò)增后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而識(shí)別并攻擊自身的腫瘤細(xì)胞。改造細(xì)胞回輸體內(nèi)后，這些細(xì)胞一旦遇見(jiàn)表達(dá)對(duì)應(yīng)抗原的腫瘤細(xì)胞，便會(huì)被激活并再擴(kuò)增，發(fā)揮其極大的特異殺傷力，殺死癌細(xì)胞?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）從患者體內(nèi)分離的T淋巴細(xì)胞，需要對(duì)其進(jìn)行基因工程改造，以得到CAR-T細(xì)胞。
①基因工程最核心的步驟是

。
②構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是

。
③可以通過(guò)PCR技術(shù)獲得大量目的基因，利用該技術(shù)時(shí)擴(kuò)增目的基因時(shí)每次循環(huán)可分為

三步，其中第三步所使用的酶是

。
（2）體外培養(yǎng)患者CAR-T細(xì)胞時(shí)，不僅要確保

的環(huán)境條件，還要定期更換培養(yǎng)液，這樣做的目的是

。
（3）結(jié)合題干信息分析，CAR-T療法價(jià)格高昂的原因可能是

（答出2點(diǎn)即可）。
發(fā)布：2024/11/8 11:59:57組卷：3引用：2難度：0.5
解析

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