腺病毒能引起人呼吸系統(tǒng)不適等癥狀，但致死率低。研究發(fā)現(xiàn)該病毒可作為基因工程的載體。陳薇等科學家研發(fā)了以人5型腺病毒（Ad5）為載體的重組新冠疫苗，這是國內(nèi)第一個進入臨床試驗階段的新冠疫苗。腺病毒載體疫苗生產(chǎn)過程示意圖如下：
回答下列問題：
（1）在制備人腎上皮細胞系（293細胞）時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)一段時間，細胞鋪滿培養(yǎng)瓶后不再分裂，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制接觸抑制。出現(xiàn)此現(xiàn)象后，需用胰蛋白酶胰蛋白酶處理，得到細胞懸液，再進行傳代傳代培養(yǎng)，以獲得更多的293細胞。
（2）新冠病毒為RNA病毒，其遺傳物質(zhì)不能直接拼接到質(zhì)粒上，因此在制備以上疫苗時需先通過逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程獲得相應的DNA．構(gòu)建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒，可使用雙酶切法，使之產(chǎn)生不同不同的粘性末端以提高目的基因與質(zhì)粒重組的成功率。據(jù)圖可知需將重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒導入293細胞，從而獲得轉(zhuǎn)基因腺病毒。
（3）檢測轉(zhuǎn)基因腺病毒攜帶的目的基因是否在人體細胞內(nèi)表達，可檢測細胞內(nèi)是否含有相應的mRNAmRNA或抗原分子，若檢測抗原分子可用單克隆抗體制備單克隆抗體制備技術獲得特異性探針。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】接觸抑制；胰蛋白酶；傳代；逆轉(zhuǎn)錄；不同；重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒；mRNA；單克隆抗體制備
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：19引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7