腺病毒能引起人呼吸系統(tǒng)不適等癥狀，但致死率低。研究發(fā)現(xiàn)該病毒可作為基因工程的載體。陳薇等科學(xué)家研發(fā)了以人5型腺病毒（Ad5）為載體的重組新冠疫苗，這是國(guó)內(nèi)第一個(gè)進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的新冠疫苗。腺病毒載體疫苗生產(chǎn)過程示意圖如下：
回答下列問題：
（1）在制備人腎上皮細(xì)胞系（293細(xì)胞）時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)一段時(shí)間，細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)瓶后不再分裂，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制接觸抑制。出現(xiàn)此現(xiàn)象后，需用胰蛋白酶胰蛋白酶處理，得到細(xì)胞懸液，再進(jìn)行傳代傳代培養(yǎng)，以獲得更多的293細(xì)胞。
（2）新冠病毒為RNA病毒，其遺傳物質(zhì)不能直接拼接到質(zhì)粒上，因此在制備以上疫苗時(shí)需先通過逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程獲得相應(yīng)的DNA．構(gòu)建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒，可使用雙酶切法，使之產(chǎn)生不同不同的粘性末端以提高目的基因與質(zhì)粒重組的成功率。據(jù)圖可知需將重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒導(dǎo)入293細(xì)胞，從而獲得轉(zhuǎn)基因腺病毒。
（3）檢測(cè)轉(zhuǎn)基因腺病毒攜帶的目的基因是否在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，可檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)是否含有相應(yīng)的mRNAmRNA或抗原分子，若檢測(cè)抗原分子可用單克隆抗體制備單克隆抗體制備技術(shù)獲得特異性探針。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】接觸抑制；胰蛋白酶；傳代；逆轉(zhuǎn)錄；不同；重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒；mRNA；單克隆抗體制備
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：19引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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