基因工程重組亞單位疫苗是預(yù)防新冠病毒感染和傳播的一種有效方案，其原理是把新冠病毒上負(fù)責(zé)“生產(chǎn)”S蛋白的那部分基因找到，構(gòu)建體外重組表達(dá)載體，導(dǎo)入到微生物體內(nèi)，“生產(chǎn)”出需要的S蛋白制成疫苗。下圖是在體外構(gòu)建病毒S蛋白重組表達(dá)載體的實(shí)驗(yàn)流程及相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)?；卮鹣铝袉?wèn)題：
| 限制酶 | BamHI | BclI | Sau3AI | HindIII |
| 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) |
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（1）從患者肺部組織中分離并提取得到病毒RNA，通過(guò)
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
獲得S蛋白的cDNA，再通過(guò) PCR
PCR
法對(duì)S蛋白的基因進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增的一般步驟是 變性→復(fù)性→延伸
變性→復(fù)性→延伸
。（2）用圖1中的質(zhì)粒X和圖2中的S蛋白基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用
BclⅠ和HindⅢ
BclⅠ和HindⅢ
兩種限制酶切割，切割后通過(guò) DNA連接
DNA連接
酶作用獲得重組質(zhì)粒。（3）轉(zhuǎn)化前，用含
Ca2+（CaCl2）
Ca2+（CaCl2）
的溶液處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。轉(zhuǎn)化后，將大腸桿菌置于含 四環(huán)素
四環(huán)素
的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，方便篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌。為進(jìn)一步鑒定篩選出的大腸桿菌是否導(dǎo)入S蛋白基因，可用引物 甲、丙
甲、丙
進(jìn)行擴(kuò)增驗(yàn)證。【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；PCR；變性→復(fù)性→延伸；BclⅠ和HindⅢ；DNA連接；Ca2+（CaCl2）；四環(huán)素；甲、丙
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：1引用：2難度：0.7
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1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來(lái)源極為有限，某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過(guò)程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過(guò)程（填序號(hào)）。過(guò)程②③采用的方法是。
（4）⑤過(guò)程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過(guò)程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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