突尼斯軟籽石榴是一種熱門水果，深受大家喜愛，但其抗寒能力差，這成為限制該種石榴栽培的重要因素?？茖W家們利用基因工程對其進行定向改造，以得到抗寒性強的優(yōu)良品種。如圖表示構建基因表達載體的方法，圖中標注的是限制酶的酶切位點，請回答下列問題：
（1）在切割目的基因時選擇的兩種限制酶最好為SmaI和PstISmaI和PstI，選擇兩種限制酶的優(yōu)勢是可避免質粒自身成環(huán)和質粒與目的基因的反向連接質粒自身成環(huán)和質粒與目的基因的反向連接。
（2）可通過PCRPCR技術對獲得的抗寒基因進行體外擴增，該過程使DNA解旋的方法與細胞內復制時的差異是體外擴增目的基因利用加熱至90～95℃的高溫使DNA解旋，細胞內復制目的基因使用解旋酶使DNA解旋體外擴增目的基因利用加熱至90～95℃的高溫使DNA解旋，細胞內復制目的基因使用解旋酶使DNA解旋，體外擴增時使用的酶具有的顯著特點是耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）。
（3）將重組質粒導入經脫分化脫分化（過程）培養(yǎng)成的軟籽石榴的愈傷組織中常用農桿菌轉化農桿菌轉化法。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】SmaI和PstI；質粒自身成環(huán)和質粒與目的基因的反向連接；PCR；體外擴增目的基因利用加熱至90～95℃的高溫使DNA解旋，細胞內復制目的基因使用解旋酶使DNA解旋；耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）；脫分化；農桿菌轉化
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：23引用：3難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6難度：0.7 -
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（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7