dMAb技術(shù)是一種通過DNA編碼產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù),比傳統(tǒng)單克隆抗體制備方法更有發(fā)展?jié)摿?。此前發(fā)表的研究顯示,以埃博拉病毒為目標(biāo)且高度優(yōu)化的基于DNA的單克隆抗體,單次給藥在小鼠血液中產(chǎn)生了高水平的抗體表現(xiàn)。如圖表示dMAb技術(shù)在埃博拉病毒感染疾病的臨床研究中的操作流程。回答下列問題:
(1)根據(jù)抵御埃博拉病毒的抗體的結(jié)構(gòu)獲得目的基因,常用PCR技術(shù)快速擴(kuò)增目的基因。在擴(kuò)增過程中,需要的原料是
4種脫氧核苷酸
4種脫氧核苷酸
,將溫度控制在90℃以上的目的是 使DNA的雙鏈解旋成單鏈
使DNA的雙鏈解旋成單鏈
。
(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒時,一般用相同的限制酶切割目的基因和Ti質(zhì)粒的脫氧核苷酸片段,目的是 產(chǎn)生相同的黏性末端,以便構(gòu)建基因表達(dá)載體
產(chǎn)生相同的黏性末端,以便構(gòu)建基因表達(dá)載體
。重組質(zhì)粒中含有啟動子,其作用是 作為RNA聚合酶識別與結(jié)合的部位,能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
作為RNA聚合酶識別與結(jié)合的部位,能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
。
(3)單克隆抗體與埃博拉病毒結(jié)合利用的原理是 抗原與抗體特異性結(jié)合
抗原與抗體特異性結(jié)合
。利用動物細(xì)胞融合技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體時,經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)行抗體檢測,其目的是 獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞
獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞
。與傳統(tǒng)利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的技術(shù)相比,dMAb技術(shù)的優(yōu)勢是 抗體的產(chǎn)生在生物體內(nèi)進(jìn)行,不需要進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng);產(chǎn)生抗體的細(xì)胞種類不局限于免疫細(xì)胞(漿細(xì)胞);可制備成DNA“疫苗”,便于存儲和運(yùn)輸;抗體直接由DNA編碼產(chǎn)生,省去反復(fù)用抗原刺激免疫細(xì)胞再細(xì)胞融合和篩選的步驟
抗體的產(chǎn)生在生物體內(nèi)進(jìn)行,不需要進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng);產(chǎn)生抗體的細(xì)胞種類不局限于免疫細(xì)胞(漿細(xì)胞);可制備成DNA“疫苗”,便于存儲和運(yùn)輸;抗體直接由DNA編碼產(chǎn)生,省去反復(fù)用抗原刺激免疫細(xì)胞再細(xì)胞融合和篩選的步驟
(寫出2點)。