如圖為轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程流程圖,其中質(zhì)粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見下表。請據(jù)圖回答下列問題:
限制酶 |
APaⅠ |
EcoRⅠ |
PstⅠ |
SmaⅠ |
識(shí)別位點(diǎn)及切割位點(diǎn) |
AG↓CT TC↑GA |
G↓AATTC CTTAA↑G |
CTGCA↓G G↑ACGTC |
CCC↓GGG GGG↑CCC |
(1)形成重組質(zhì)粒A時(shí),應(yīng)選用限制酶
PstI和EcoRI
PstI和EcoRI
,對
含抗病基因的DNA和質(zhì)粒
含抗病基因的DNA和質(zhì)粒
進(jìn)行切割。
(2)一個(gè)質(zhì)粒被限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同時(shí)切割后可得到
3/三
3/三
個(gè)DNA片段,
4/四
4/四
個(gè)黏性末端。
(3)培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長,欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞,應(yīng)使重組質(zhì)粒A中含有
抗氨芐青霉素(或氨芐青霉素抗性)
抗氨芐青霉素(或氨芐青霉素抗性)
基因。
(4)要培養(yǎng)既抗病又無病毒的香蕉植株,應(yīng)將農(nóng)桿菌導(dǎo)入
根(莖、芽)尖(或分生組織)
根(莖、芽)尖(或分生組織)
細(xì)胞中,再進(jìn)行植物的組織培養(yǎng)。植物激素是關(guān)鍵激素,它們的
濃度和比例
濃度和比例
等會(huì)都會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)展方向。
(5)以上獲得轉(zhuǎn)基因抗病香蕉植株的過程中,所用到的原理有
基因重組、植物細(xì)胞具有全能性
基因重組、植物細(xì)胞具有全能性
。