近年來,基因治療作為一種新的治療手段,可以治療多種疾病。GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子,對損傷的神經(jīng)細(xì)胞具有營養(yǎng)和保護(hù)作用。研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的表達(dá)載體(如圖所示),并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中用于干細(xì)胞基因治療的研究。請回答下列問題:
(1)若要獲得大量GDNF基因,可通過 PCRPCR技術(shù)進(jìn)行體外擴增,該技術(shù)所需的引物有 22種。
(2)基因工程中,最核心的步驟是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建(填圖中序號);能否用限制酶XhoⅠ和EcoRⅠ同時切割目的基因和載體,并說明原因 不可以,如果使用限制酶XhoⅠ和EcoRⅠ同時切割目的基因和載體,那么重組質(zhì)粒將丟失啟動子不可以,如果使用限制酶XhoⅠ和EcoRⅠ同時切割目的基因和載體,那么重組質(zhì)粒將丟失啟動子。重組載體上啟動子的作用是 啟動子上有mRNA聚合酶的識別和結(jié)合位點,用于對目的基因的轉(zhuǎn)錄啟動子上有mRNA聚合酶的識別和結(jié)合位點,用于對目的基因的轉(zhuǎn)錄。
(3)圖中a稱為 內(nèi)細(xì)胞團(tuán)內(nèi)細(xì)胞團(tuán);b將來發(fā)育為 胎膜和胎盤胎膜和胎盤。
(4)過程⑥產(chǎn)生的小鼠并不都是轉(zhuǎn)基因小鼠的原因是 轉(zhuǎn)基因小鼠的染色體的DNA上沒有插入目的基因,目的基因不能穩(wěn)定的表達(dá)。轉(zhuǎn)基因小鼠的染色體的DNA上沒有插入目的基因,目的基因不能穩(wěn)定的表達(dá)。。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】PCR;2;基因表達(dá)載體的構(gòu)建;不可以,如果使用限制酶XhoⅠ和EcoRⅠ同時切割目的基因和載體,那么重組質(zhì)粒將丟失啟動子;啟動子上有mRNA聚合酶的識別和結(jié)合位點,用于對目的基因的轉(zhuǎn)錄;內(nèi)細(xì)胞團(tuán);胎膜和胎盤;轉(zhuǎn)基因小鼠的染色體的DNA上沒有插入目的基因,目的基因不能穩(wěn)定的表達(dá)。
【解答】
【點評】
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