如圖1表示某生物DNA結(jié)構(gòu)的一部分及限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)，請(qǐng)回答以下問題。
| 限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ | HindlⅢ | SacⅠ |
| 識(shí)別序列和切割位點(diǎn) | G↓AATTC | G↓GATCC | A↓AGCTT | GAGCT↓C |
引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）
引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）
，一般要經(jīng)歷多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為 變性、復(fù)性、延伸
變性、復(fù)性、延伸
三步。擴(kuò)增后切割目的基因，應(yīng)使用表中的限制酶是 EcoRI和SacI
EcoRI和SacI
，這樣做的原因是 可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）
可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）
。（2）若目的基因?yàn)橐葝u素基因，科研人員構(gòu)建了如圖2所示的重組載體，tetr為四環(huán)素抗性基因，ampr為氨芐青霉素抗性基因。構(gòu)建重組載體需要的酶有
DNA連接酶和限制酶
DNA連接酶和限制酶
。在重組質(zhì)粒上插入大腸桿菌復(fù)制原點(diǎn)的目的是 使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增
使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增
。圖2中的啟動(dòng)子上有 RNA聚合酶
RNA聚合酶
的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，從而驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。將重組載體導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)后，將其涂布于含 氨芐青霉素
氨芐青霉素
的選擇培養(yǎng)基上。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）；變性、復(fù)性、延伸；EcoRI和SacI；可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）；DNA連接酶和限制酶；使重組載體能在大腸桿菌中復(fù)制擴(kuò)增；RNA聚合酶；氨芐青霉素
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：36引用：5難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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