器官移植已成為治療臟器功能衰竭的有效手段,但移植排斥是影響移植物和患者存活的主要問題。同種異體排斥反應(yīng)的細(xì)胞學(xué)機(jī)制主要為T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。其中白細(xì)胞介素-2(IL-2)參與移植排斥反應(yīng)。白細(xì)胞介素-2(IL-2)是主要由活化的CD++細(xì)胞產(chǎn)生的免疫調(diào)節(jié)因子,對機(jī)體的免疫應(yīng)答和抗病毒感染等有重要作用??茖W(xué)工作者將含IL-2基因的DNA片段和質(zhì)粒pPIC9K構(gòu)建成重組質(zhì)粒,并導(dǎo)入酵母菌GS15(組氨酸缺陷菌株,不能合成組氨酸)中,篩選到了能分泌IL-2的工程菌株。請回答:
(1)構(gòu)建重組質(zhì)粒需要用到的酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶,質(zhì)粒上的啟動子的作用是 作為RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點,驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄作為RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點,驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。根據(jù)上圖分析,為了構(gòu)建重組質(zhì)粒應(yīng)該選用 EcoRⅠ酶和NotⅠ酶EcoRⅠ酶和NotⅠ酶(填酶)分別切割含有IL-2基因的DNA片段和質(zhì)粒。
(2)用不含組氨酸的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,有導(dǎo)入了質(zhì)粒pPIC9K和導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的兩種酵母菌細(xì)胞。這兩種類型的細(xì)胞能否被篩選出來,若能,則說明篩選的原理;若不能,則說明篩選的措施。 不能,用含有四環(huán)素和組氨酸的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選不能,用含有四環(huán)素和組氨酸的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。
(3)制備能分泌IL-2的工程菌株宜用酵母菌作為受體細(xì)胞,而不適合用大腸桿菌。從細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的角度分析,原因是 酵母菌是真核細(xì)胞,其含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對蛋白質(zhì)進(jìn)行加工修飾酵母菌是真核細(xì)胞,其含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對蛋白質(zhì)進(jìn)行加工修飾。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制酶和DNA連接酶;作為RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點,驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄;EcoRⅠ酶和NotⅠ酶;不能,用含有四環(huán)素和組氨酸的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選;酵母菌是真核細(xì)胞,其含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對蛋白質(zhì)進(jìn)行加工修飾
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/7 8:0:9組卷:5引用:2難度:0.6
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1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>
A.DNA連接酶具有特異性,只能連接同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割形成的黏性末端 B.若能在植物細(xì)胞中檢測到相應(yīng)的目的基因,則說明基因工程項目獲得成功 C.蛋白質(zhì)工程需構(gòu)建基因表達(dá)載體,改造后的蛋白質(zhì)的性狀可遺傳給后代 D.將抗蟲基因整合到某植物的線粒體DNA中,可通過花粉傳播,從而引起基因污染 發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6 -
3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>
A.質(zhì)粒上標(biāo)記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選 B.目的基因必須整合到受體細(xì)胞的DNA中才能復(fù)制 C.構(gòu)建表達(dá)載體時需要在目的基因前加上起始密碼子 D.誘變育種和基因工程的原理相同 發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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