Bar基因存在于青麻、黑麥草等生物體內(nèi),其編碼的酶可使除草劑草丁膦失去毒害作用。培育轉(zhuǎn)Bar基因大豆,對(duì)于控制豆田雜草有重要意義。為了把Bar基因?qū)氪蠖辜?xì)胞,需將Bar基因插入pUc18質(zhì)粒中構(gòu)建中間表達(dá)載體,然后與Ti質(zhì)粒重組為重組表達(dá)載體系統(tǒng)。如圖為pUc18質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖,回答下列問題:
(1)不能利用黑麥草與大豆進(jìn)行有性雜交的方法讓大豆獲得Bar基因,原因是 黑麥草與大豆之間存在生殖隔離黑麥草與大豆之間存在生殖隔離
(2)構(gòu)建中間表達(dá)載體時(shí),為了便于篩選出含有Bar基因的重組質(zhì)粒,需將Br基因插入到pUc18質(zhì)粒的 lacZlacZ中形成重組質(zhì)粒并導(dǎo)入大腸桿菌,然后在添加 氨芐青霉素和Xgal氨芐青霉素和Xgal的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌,菌落呈白色的即為含中間表達(dá)載體的大腸桿菌。
(3)中間表達(dá)載體需插入到Ti質(zhì)粒的 T-DNAT-DNA中才能將Bar基因整合到植物細(xì)胞的染色體DNA上,原因是 T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。
(4)可通過 顯微注射顯微注射法直接將重組表達(dá)載體導(dǎo)入大豆細(xì)胞的原生質(zhì)體。導(dǎo)入Bar基因的原生質(zhì)體需 再生出細(xì)胞壁再生出細(xì)胞壁,經(jīng)脫分化形成 愈傷組織愈傷組織,再進(jìn)一步分化才能獲得轉(zhuǎn)Bar基因大豆植株。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】黑麥草與大豆之間存在生殖隔離;lacZ;氨芐青霉素和Xgal;T-DNA;T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上;顯微注射;再生出細(xì)胞壁;愈傷組織
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:23引用:2難度:0.6
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