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菁優(yōu)網(wǎng)大芻草具有較強(qiáng)的耐鹽堿能力,該性狀與M蛋白有關(guān)??茖W(xué)家通過(guò)PCR技術(shù)獲取和擴(kuò)增M蛋白基因(如圖1)。將獲得的大量M蛋白基因與質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體,各部分結(jié)構(gòu)如圖2所示。
(1)PCR一般可分為
變性、復(fù)性、延伸
變性、復(fù)性、延伸
三步。據(jù)圖1分析,PCR過(guò)程應(yīng)選擇的引物是
Ⅱ、Ⅲ
Ⅱ、Ⅲ
,引物的作用是
使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸
使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸

(2)在M蛋白基因兩端設(shè)計(jì)不同黏性末端的目的是
防止M蛋白基因自身環(huán)化,保證M蛋白基因在質(zhì)粒上正向連接
防止M蛋白基因自身環(huán)化,保證M蛋白基因在質(zhì)粒上正向連接
。質(zhì)粒中氨芐青霉素抗性基因的作用是
便于重組DNA分子的篩選
便于重組DNA分子的篩選
。
(3)為實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒和M蛋白基因的高效連接,切割質(zhì)粒時(shí)選用限制酶XmaⅠ而不選用限制酶SmaⅠ的原因是
XmaⅠ酶切出的黏性末端與M蛋白基因黏性末端相同,SmaⅠ的酶切末端為平末端,無(wú)法與M蛋白基因的黏性末端連接
XmaⅠ酶切出的黏性末端與M蛋白基因黏性末端相同,SmaⅠ的酶切末端為平末端,無(wú)法與M蛋白基因的黏性末端連接
。為將M蛋白基因連接到質(zhì)粒上,還需要等酶
BglⅡ、DNA連接酶
BglⅡ、DNA連接酶
。

【答案】變性、復(fù)性、延伸;Ⅱ、Ⅲ;使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸;防止M蛋白基因自身環(huán)化,保證M蛋白基因在質(zhì)粒上正向連接;便于重組DNA分子的篩選;XmaⅠ酶切出的黏性末端與M蛋白基因黏性末端相同,SmaⅠ的酶切末端為平末端,無(wú)法與M蛋白基因的黏性末端連接;BglⅡ、DNA連接酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:9引用:1難度:0.4
相似題
  • 1.某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲(chóng)基因和Bt2抗蟲(chóng)基因的編碼序列,并運(yùn)用交錯(cuò)延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲(chóng)性能強(qiáng)的重組B基因,轉(zhuǎn)入煙草獲得成功,過(guò)程如圖所示。下列選項(xiàng)正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)
    注:①交錯(cuò)延伸PCR:基因Bt1和Bt2均作為模板,所需引物相同,圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動(dòng)子Pr1a可在煙草葉肉細(xì)胞中特異性啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。③圖中生長(zhǎng)素合成酶基因是通過(guò)成熟mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA片段,可使植物細(xì)胞合成生長(zhǎng)素。

    發(fā)布:2024/11/16 21:0:1組卷:36引用:2難度:0.5
  • 2.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 3.經(jīng)由食物攝取過(guò)量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過(guò)敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命,因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來(lái)源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過(guò)上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫(xiě)下列編號(hào))。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過(guò)程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動(dòng)DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
    菁優(yōu)網(wǎng)
    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的
     

    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開(kāi)后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開(kāi),才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實(shí)驗(yàn)操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X(jué)-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
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