胰島素作為治療糖尿病的特效藥，市場潛力巨大，科學(xué)家利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得轉(zhuǎn)入胰島素基因的大腸桿菌，通過發(fā)酵工程，實(shí)現(xiàn)胰島素的大量生產(chǎn)。圖1表示胰島素基因及其上的限制酶酶切位點(diǎn)，圖2表示所用質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)?；卮鹨韵聠栴}。
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（1）對(duì)微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域，這是因?yàn)槲⑸锞哂?

生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單、生長繁殖快、對(duì)環(huán)境因素敏感、容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作

生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單、生長繁殖快、對(duì)環(huán)境因素敏感、容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作

等優(yōu)點(diǎn)（寫出兩點(diǎn)即可）。現(xiàn)已知DNA復(fù)制時(shí)，子鏈延伸的方向是從5′→3′，即沿著模板鏈的3′→5′。若要擴(kuò)增出胰島素基因并用于表達(dá)載體的構(gòu)建，應(yīng)選擇的引物是

引物1和引物8

引物1和引物8

，選擇這兩種引物的原因是

既能保證正常合成子鏈，又包含限制酶切割位點(diǎn)

既能保證正常合成子鏈，又包含限制酶切割位點(diǎn)

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（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，最好選擇的限制酶是

BamHⅠ和HindⅢ

BamHⅠ和HindⅢ

，原因是

既能防止質(zhì)粒自身環(huán)化，又可以保證目的基因正確連接在質(zhì)粒上

既能防止質(zhì)粒自身環(huán)化，又可以保證目的基因正確連接在質(zhì)粒上

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（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)，需用

Ca²⁺

Ca²⁺

處理大腸桿菌，其目的是

使大腸桿菌變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞，便于從周圍環(huán)境吸收DNA分子

使大腸桿菌變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞，便于從周圍環(huán)境吸收DNA分子

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（4）為了將成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來，甲同學(xué)在加入氨芐青霉素的培養(yǎng)基中進(jìn)行接種，結(jié)果如圖3。乙同學(xué)認(rèn)為該結(jié)果得到的菌落并不都是成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，你認(rèn)為乙同學(xué)判斷的理由是

只導(dǎo)入了質(zhì)粒的大腸桿菌也能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上形成菌落

只導(dǎo)入了質(zhì)粒的大腸桿菌也能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上形成菌落

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