Bt抗蟲蛋白具有抵抗蟲害的作用。為獲取大量Bt抗蟲蛋白，研究者從基因數(shù)據(jù)庫中獲取了該蛋白的基因編碼序列（簡(jiǎn)稱Bt-Cry1基因），如圖1所示；通過基因工程技術(shù)利用大腸桿菌表達(dá)該蛋白，所用載體如圖2所示，箭頭表示不同限制酶的酶切位點(diǎn)。
回答下列問題：
（1）根據(jù)圖中信息，可選用 PvuⅡ、EcoRⅠPvuⅡ、EcoRⅠ兩種限制酶切割含目的基因的DNA片段和載體，使目的基因與載體高效重組，若選用PstⅠ進(jìn)行切割，會(huì)造成 目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和隨意連接目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和隨意連接。限制酶來源于原核生物，不會(huì)切割本身的DNA分子是因?yàn)?含有某種限制酶的原核生物，其DNA分子中不存在該酶的識(shí)別序列或識(shí)別序列已經(jīng)被修飾含有某種限制酶的原核生物，其DNA分子中不存在該酶的識(shí)別序列或識(shí)別序列已經(jīng)被修飾。
（2）基因表達(dá)載體中必須含有啟動(dòng)子和終止子，其中啟動(dòng)子的作用是 與RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出RNA與RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出RNA，圖中氨芐青霉素抗性基因的作用是 作為標(biāo)記基因，檢測(cè)Bt-Cry1基因是否導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞作為標(biāo)記基因，檢測(cè)Bt-Cry1基因是否導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞。
（3）導(dǎo)入目的基因時(shí)，首先用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌使其成為能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)的細(xì)胞，再將重組載體溶于緩沖液中與受體細(xì)胞混合；在一定的溫度下可以促進(jìn)大腸桿菌完成 轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化過程。
（4）檢測(cè)和鑒定目的基因是否在大腸桿菌中成功表達(dá)的方法是 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PvuⅡ、EcoRⅠ；目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和隨意連接；含有某種限制酶的原核生物，其DNA分子中不存在該酶的識(shí)別序列或識(shí)別序列已經(jīng)被修飾；與RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出RNA；作為標(biāo)記基因，檢測(cè)Bt-Cry1基因是否導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞；Ca2+；轉(zhuǎn)化；抗原—抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：9引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
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