纖維素酶能將纖維素降解成葡萄糖,可用于處理造紙廠排放的污水。研究人員從不同環(huán)境地表上采集土壤、腐爛的樹枝等接種到MEA(用于真菌培養(yǎng))培養(yǎng)基上,經(jīng)過一系列分離純化,最終篩選出了高產(chǎn)纖維素酶的真菌。請回答下列問題:
(1)接種后倒置培養(yǎng)一段時間,MEA培養(yǎng)基上會觀察到菌落,菌落是指 在固體培養(yǎng)基上由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體在固體培養(yǎng)基上由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體。
(2)實際生產(chǎn)中,通過培養(yǎng)真菌獲取的纖維素酶蛋白往往與其它物質(zhì)混合在一起。因此,得到纖維素酶的粗提取物后,先要通過 透析透析進(jìn)行粗分離,再通過 凝膠色譜(或者分配色譜)凝膠色譜(或者分配色譜)法進(jìn)行純化,最后通過 SDS-聚丙烯酰胺電泳SDS-聚丙烯酰胺電泳的方法鑒定纖維素酶的純度。
(3)用于生產(chǎn)實踐前,還需要測定純化后的纖維素酶的活性。纖維素酶的活性以 酶所催化的化學(xué)反應(yīng)速率酶所催化的化學(xué)反應(yīng)速率來表示。
(4)游離的纖維素酶易受溫度、pH等因素的影響,且不易分離和回收。為了提高果膠酶的重復(fù)使用率,降低生產(chǎn)成本,請根據(jù)所學(xué)知識提出一項解決措施:利用固定化技術(shù)固定真菌細(xì)胞(或固定纖維素酶)利用固定化技術(shù)固定真菌細(xì)胞(或固定纖維素酶)。
(5)獲取真菌后,若要長期保存,可以采用 甘油管藏法甘油管藏法的方法。
【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)(稀釋涂布平板法);酶的特性及應(yīng)用.
【答案】在固體培養(yǎng)基上由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體;透析;凝膠色譜(或者分配色譜);SDS-聚丙烯酰胺電泳;酶所催化的化學(xué)反應(yīng)速率;利用固定化技術(shù)固定真菌細(xì)胞(或固定纖維素酶);甘油管藏法
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:2難度:0.6
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1.目前全球肆虐的病毒是一種以前尚未在人類中發(fā)現(xiàn)的新型冠狀病毒,命名為2019-nCoV(以下簡稱nCoV)。它具有已知RNA病毒中最大的基因組,單鏈RNA大小為3萬個堿基左右。結(jié)構(gòu)如圖。
疫苗預(yù)防
針對該病毒現(xiàn)在還沒有具有針對性的特效藥,因此各國都寄希望于研制出針對該病毒的疫苗。疫苗分為以下5種:滅活疫苗,減毒活疫苗,重組蛋白疫苗,核酸疫苗,重組病毒載體疫苗。
(1)重組蛋白疫苗:中科院微生物所動物試驗階段
可以讓大腸桿菌表達(dá)出nCoV的S蛋白,打進(jìn)人體,讓免疫系統(tǒng)針對該蛋白產(chǎn)生抗體。該過程需要將S蛋白基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌體內(nèi),你認(rèn)為對該過程描述合理的是
A.用PCR可以短時間獲得大量的S蛋白基因,根據(jù)需要在基因兩端加上的限制性酶切位點(diǎn)可以不同
B.該過程的表達(dá)載體上要具有復(fù)制原點(diǎn)、起始密碼子、終止密碼子、抗生素抗性基因和S蛋白基因
C.通過Ca2+處理大腸桿菌以獲得感受態(tài)細(xì)胞,該狀態(tài)的細(xì)胞能夠提高表達(dá)載體整合到擬核上的效率
D.能夠利用大腸桿菌DNA擴(kuò)增出目的基因,說明成功導(dǎo)入了S蛋白基因,是否表達(dá)S蛋白還需要抗體檢測
(2)獲得的工程菌需要篩選才能投入疫苗的生產(chǎn),下列于此過程有關(guān)表述正確的是
A.篩選和鑒定菌種要在培養(yǎng)基中加入瓊脂,大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上會出現(xiàn)黑色菌落
B.培養(yǎng)基配制過程要稱量、溶化、滅菌,倒平板之前調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍以利于細(xì)菌繁殖
C.如果需要計數(shù),則用稀釋涂布平板法涂布平板之后對菌落計數(shù),顯微鏡直接觀察值可能偏小
D.將高產(chǎn)S蛋白的菌種保存起來可以用4℃臨時保藏和-20℃甘油管藏等方法,后者保存時間長
(3)工程菌操作整個過程需要嚴(yán)格的無菌操作,下列無菌操作方式合理的有
A.每次使用接種環(huán)前后都要進(jìn)行灼燒滅菌,但是灼燒之后要置于菌液冷卻才能使用
B.液體培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌,加了瓊脂的固體培養(yǎng)基可以用干熱滅菌箱滅菌
C.操作者雙手應(yīng)該用酒精擦拭消毒,但是該過程不能完全殺死微生物的芽孢和孢子
D.倒平板凝固后要將培養(yǎng)皿倒置,目的是防止水分過快蒸發(fā)以及冷凝水回滴造成污染
(4)核酸疫苗:美國人體試驗階段(未做動物試驗)
將S蛋白對應(yīng)的mRNA用脂膜包裹打進(jìn)人體,讓它在細(xì)胞里表達(dá)病毒的S蛋白。以下對該方法的誤解是
A.核酸注入人體細(xì)胞只會造成體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生變化,并不影響生殖細(xì)胞
B.該過程流程大大簡化,節(jié)省了重組蛋白疫苗的生產(chǎn)S蛋白的時間
C.mRNA如果成功進(jìn)入細(xì)胞,翻譯產(chǎn)生的S蛋白就可以在細(xì)胞內(nèi)對抗病毒
D.核酸外脂膜與細(xì)胞膜融合,幫助核酸進(jìn)入細(xì)胞指導(dǎo)S蛋白的翻譯
(5)重組病毒載體疫苗:軍事科學(xué)院臨床Ⅱ期階段(動物試驗和臨床Ⅰ期完成)
是把nCoV的部分基因植入到不致病但侵染能力很強(qiáng)的腺病毒載體里,重組成新病毒。任何疫苗在大規(guī)模使用前,最好通過動物試驗再進(jìn)行臨床試驗。大規(guī)模試驗用哺乳動物一般用小鼠,但是小鼠沒有人類ACE2蛋白,因此獲得大量人源ACE2轉(zhuǎn)基因小鼠成為動物疫苗試驗的重要步驟。在此過程中下 列表述合理的是
A.鑒于人類基因組測序已經(jīng)完成,既可以從人類基因組文庫中獲取目的基因,又可以從cDNA文庫中獲取
B.鑒于小鼠也是真核生物,既可以將人類ACE2完整的基因?qū)胄∈篌w內(nèi),又可以導(dǎo)入無內(nèi)含子的目 的基因
C.鑒于受體細(xì)胞是小鼠的受精卵細(xì)胞,重組DNA分子導(dǎo)入最好用顯微注射的方法,該方法不適合原核生物細(xì)胞
D.如果有轉(zhuǎn)人源ACE2基因小鼠若干,要在短時間獲得大量實驗小鼠,可用核移植的方法克隆很多小鼠發(fā)布:2024/12/29 8:0:2組卷:14引用:1難度:0.6 -
2.某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解,會對環(huán)境造成污染,只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基,甲的組分為無機(jī)鹽、水和S,乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y?;卮鹣铝袉栴}:
(1)乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是
(2)實驗中初步估測搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個/mL,若要在每個平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液,且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個,則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋
(3)在步驟⑤的篩選過程中,發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時,某菌株對S的降解量反而下降,其原因可能是
(4)上述實驗中,甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同,但都能為細(xì)菌的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì),即發(fā)布:2024/12/27 8:0:2組卷:5引用:2難度:0.7 -
3.致病菌與抗生素。
結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的傳染病。 結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁厚脂質(zhì)含量高,能抵御不利自然環(huán)境,在干痰中可存活 6-8 個月,若黏附于塵埃上可保持傳染性 8-10 天。人體被感染后結(jié)核分枝桿菌可侵犯全身各組織器官,但以肺部感染最多。
(1)結(jié)核病的傳播途徑主要是
A、空氣傳播 B、接觸傳播 C、媒介物傳播 D、病媒傳播
(2)根據(jù)病原菌在體內(nèi)的感染部位,推測結(jié)核分枝桿菌的代謝方式是
A、異養(yǎng)厭氧型 B、自養(yǎng)厭氧型 C、自養(yǎng)好氧型 D、異養(yǎng)好氧型
為探究不同抗生素對結(jié)核分枝桿菌的抑菌效果,研究者從患者體內(nèi)提取的病原菌進(jìn)行分離培養(yǎng)。 培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基主要含有天門冬氨酸、甘油、雞蛋黃、KH2PO4、MgSO4等。
(3)此培養(yǎng)基成分中既能作為氮源同時提供生長因子的是
將分離得到的結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行增殖培養(yǎng)后,取細(xì)菌培養(yǎng)液 2 滴涂布于固體培養(yǎng)基上,然后將浸有相同濃度不同種類的抗生素圓紙片置于培養(yǎng)基表面,37℃培養(yǎng) 4 周,實驗結(jié)果如圖1.其中圓紙片 A、B 分別浸過抗生素 A 和抗生素 B,圓紙片 C 浸過抗生素 A、B 的混合物。圖2是細(xì)菌結(jié)構(gòu)示意圖,圖中箭頭表示不同抗生素的作用位置。
(4)欲得到如圖1實驗結(jié)果,接種過程用到的實驗器材有
(5)實驗中圓紙片 D 用作實驗對照,對圓紙片D的處理方法是發(fā)布:2024/12/22 8:0:1組卷:33引用:1難度:0.6
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