有研究表明CDKN2B基因與小鼠的壽命有關(guān)，科學(xué)家將該基因?qū)胄∈篌w內(nèi)，統(tǒng)計其壽命是否高于正常小鼠。圖1表示CDKN2B基因與相關(guān)限制酶酶切位點，該基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA堿基序列與A鏈的堿基序列相同（T、U視為相同的堿基），圖2為質(zhì)粒簡圖，請回答下列有關(guān)問題：
（1）科學(xué)家首先采用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴增。PCR-過程中有兩次升溫一次降溫，其中降溫的目的是讓兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合讓兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。
（2）科學(xué)家在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程時，目的基因應(yīng)插在啟動子啟動子和終止子終止子之間才能正常表達(dá)。單獨使用限制酶HindⅢ分別切割目的基因和載體后產(chǎn)生黏性末端。攜帶CDKN2B基因的重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)約一半的細(xì)胞中沒有檢測到CDKN2B蛋白，原因是部分基因反向連接部分基因反向連接。為了避免這種現(xiàn)象的發(fā)生，應(yīng)對以上方法進(jìn)行改進(jìn)，改進(jìn)措施為同時用PstⅠ，EcoRI分別對目的基因和載體進(jìn)行酶切同時用PstⅠ，EcoRI分別對目的基因和載體進(jìn)行酶切。
（3）若想讓一個轉(zhuǎn)入了自的基因的受精卵發(fā)育成多個個體，可以采用胚胎分割胚胎分割技術(shù)，操作時應(yīng)注意做到將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】讓兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合；啟動子；終止子；部分基因反向連接；同時用PstⅠ，EcoRI分別對目的基因和載體進(jìn)行酶切；胚胎分割；將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：8引用：1難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國科研團(tuán)隊研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ）
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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