將蘇云金芽孢桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因棉，其過(guò)程如圖所示（注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中）。

（1）通過(guò)從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增或

人工化學(xué)合成

人工化學(xué)合成

等方法，都可獲取目的基因。
（2）過(guò)程①需用同種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切，使二者的兩端形成

相同的黏性末端

相同的黏性末端

。為將過(guò)程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái)，應(yīng)使用添加含

卡那霉素

卡那霉素

的培養(yǎng)基。
（3）過(guò)程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓

T-DNA

T-DNA

進(jìn)入棉花細(xì)胞。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法除題中所述外，還可采用

基因槍法/花粉管通道法

基因槍法/花粉管通道法

（寫(xiě)出一種即可）。
（4）從棉花細(xì)胞到試管苗運(yùn)用的技術(shù)原理是

植物細(xì)胞具有全能性

植物細(xì)胞具有全能性

。
（5）培育轉(zhuǎn)基因棉的基本原理是讓Bt蛋白的基因在棉花細(xì)胞中

穩(wěn)定和高效的表達(dá)

穩(wěn)定和高效的表達(dá)

，為檢驗(yàn)其是否成功，常用的方法是

讓棉鈴蟲(chóng)攝入該葉片，觀察其存活情況

讓棉鈴蟲(chóng)攝入該葉片，觀察其存活情況

。