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菁優(yōu)網(wǎng)馬鈴薯是重要的塊莖類糧食作物。二倍體馬鈴薯普遍存在自交不親和的現(xiàn)象,導(dǎo)致無(wú)法使用種子種植馬鈴薯。二倍體馬鈴薯的自交不親和是由核糖核酸酶基因(S-RNase)控制的,我國(guó)科研人員通過基因編輯技術(shù)敲除了馬鈴薯的S-RNase基因,獲得自交親和的二倍體馬鈴薯,為馬鈴薯雜交育種提供了全新的技術(shù)體系。下圖是科研人員用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)定點(diǎn)敲除S-RNase基因的示意圖,回答下列問題:
(1)用于編輯不同基因的CRISPR/Cas9復(fù)合物中向?qū)NA堿基序列不同,因此首先要確定S-RNase基因中的待編輯序列,可以通過PCR技術(shù)擴(kuò)增S-RNase基因,作為編碼特定向?qū)NA的模板。擴(kuò)增時(shí)需要根據(jù)
S-RNase基因的脫氧核苷酸序列
S-RNase基因的脫氧核苷酸序列
設(shè)計(jì)引物,引物的作用是
使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

(2)CRISPR/Cas9系統(tǒng)能精準(zhǔn)識(shí)別相關(guān)基因,依據(jù)的原理是向?qū)NA與目標(biāo)DNA發(fā)生
堿基互補(bǔ)配對(duì)
堿基互補(bǔ)配對(duì)
;Cas9蛋白可催化
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
(填化學(xué)鍵名稱)水解,剪切特定DNA片段。
(3)欲檢測(cè)經(jīng)上述基因編輯技術(shù)得到的植株是否已具有自交親和性狀,最簡(jiǎn)便的方法是
讓該植株自交,觀察能否產(chǎn)生種子(或觀察該植株能否自交產(chǎn)生種子)
讓該植株自交,觀察能否產(chǎn)生種子(或觀察該植株能否自交產(chǎn)生種子)
。
(4)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對(duì)象出錯(cuò)而造成“脫靶”,向?qū)NA的序列長(zhǎng)短影響成功率,序列越短,脫靶率越高。脫靶最可能的原因是
非基因編輯對(duì)象也可能含有與向?qū)NA配對(duì)的堿基序列,造成向?qū)NA與之結(jié)合而脫靶
非基因編輯對(duì)象也可能含有與向?qū)NA配對(duì)的堿基序列,造成向?qū)NA與之結(jié)合而脫靶
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】S-RNase基因的脫氧核苷酸序列;使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;堿基互補(bǔ)配對(duì);磷酸二酯鍵;讓該植株自交,觀察能否產(chǎn)生種子(或觀察該植株能否自交產(chǎn)生種子);非基因編輯對(duì)象也可能含有與向?qū)NA配對(duì)的堿基序列,造成向?qū)NA與之結(jié)合而脫靶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:16引用:3難度:0.6
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    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項(xiàng))等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
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    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號(hào))。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
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    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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