人類胰島素基因位于第11號(hào)染色體上,長(zhǎng)度8416bp,包含3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子,人類胰島素的氨基酸序列已知?;卮鹣嚓P(guān)問題:
(1)如圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法,除了此方法外,還可以利用的方法是從基因文庫(kù)獲取或人工合成從基因文庫(kù)獲取或人工合成。
(2)利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因,在緩沖液中除了要添加模板和引物外,還需要添加的物質(zhì)有四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。
(3)經(jīng)過33輪循環(huán)可以得到所需的目的基因,一個(gè)DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán),需要引物A3131個(gè),從PCR的過程和DNA分子的特點(diǎn),試著寫出設(shè)計(jì)引物需要注意的問題引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列、引物長(zhǎng)度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列、引物長(zhǎng)度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列(答出2點(diǎn)即可)。
(4)利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子,遷移速度取決于DNA分子的大小DNA分子的大小。
(5)利用圖示方法獲取的目的基因,直接構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入大腸桿菌,能不能表達(dá)出人胰島素,判斷并說明理由不能,因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子,大腸桿菌無法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯,導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤不能,因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子,大腸桿菌無法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯,導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】從基因文庫(kù)獲取或人工合成;四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);3;31;引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列、引物長(zhǎng)度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列;DNA分子的大小;不能,因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子,大腸桿菌無法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯,導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/5/23 20:38:36組卷:29引用:4難度:0.6
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1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
A.應(yīng)根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計(jì)兩種引物 B.PCR每一循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三個(gè)過程 C.PCR結(jié)束后有靶分子的反應(yīng)單位能檢測(cè)出熒光 D.每個(gè)反應(yīng)單位中都需要加入解旋酶和耐高溫DNA聚合酶 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
2.科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問題:
(1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
(2)PCR過程所依據(jù)的原理是
(3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為
(4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C.人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克?。梢垣@得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>
A.在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān) B.凝膠中DNA分子通過染色,可以在波長(zhǎng)300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來 C.該實(shí)驗(yàn)用到的緩沖液和酶,使用前為加快融化速度,從冰箱取出直接水浴加熱 D.電泳技術(shù)可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關(guān)系的鑒定 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7