已知新冠病毒的S抗原基因編碼的S蛋白在感染人體細(xì)胞的過(guò)程中起到關(guān)鍵作用,S蛋白與人細(xì)胞膜上ACE2受體結(jié)合后,新冠病毒入侵人體細(xì)胞。我國(guó)陳薇院士團(tuán)隊(duì)成功開(kāi)發(fā)了一種以人復(fù)制缺陷腺病毒為載體的重組新型冠狀病毒基因疫苗,目前已獲批上市。回答下列問(wèn)題:
(1)制備腺病毒載體新冠疫苗時(shí),首先需在 逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以新冠病毒的遺傳物質(zhì)RNA為模板經(jīng)過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到S抗原基因后,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增S抗原基因的體系中需加入 耐高溫的DNA聚合耐高溫的DNA聚合酶。
(2)腺病毒DNA上有 一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn),便于S抗原基因插入,S抗原基因整合進(jìn)腺病毒基因組時(shí),需將S抗原基因插在腺病毒載體的啟動(dòng)子和終止子之間,使S抗原基因能 表達(dá)出S蛋白表達(dá)出S蛋白,從而激發(fā)人體產(chǎn)生抵抗新冠病毒的抗體和記憶細(xì)胞。
(3)研究人員還可將S蛋白注入動(dòng)物體內(nèi),一段時(shí)間后從其脾臟中獲取漿細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞融合,并利用選擇培養(yǎng)基篩選出 既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞。接著經(jīng)過(guò)多次篩選并在體外培養(yǎng),獲得針對(duì)S蛋白的單克隆抗體。
(4)將新冠病毒滅活制成的滅活疫苗對(duì)預(yù)防新冠肺炎也有很好的效果,這種疫苗免疫程序是兩針免疫,接種間隔為3~8周,間隔時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、過(guò)短都可能影響免疫預(yù)防的效果,原因可能是 間隔時(shí)間太短,前一次產(chǎn)生的抗體水平較高,會(huì)將后一次接種的疫苗中和,降低疫苗的作用效果;間隔時(shí)間太長(zhǎng),前一次的記憶細(xì)胞減少,使得后一次接種的疫苗產(chǎn)生的免疫加強(qiáng)效果下降間隔時(shí)間太短,前一次產(chǎn)生的抗體水平較高,會(huì)將后一次接種的疫苗中和,降低疫苗的作用效果;間隔時(shí)間太長(zhǎng),前一次的記憶細(xì)胞減少,使得后一次接種的疫苗產(chǎn)生的免疫加強(qiáng)效果下降。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶;耐高溫的DNA聚合;一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn);表達(dá)出S蛋白;既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體;間隔時(shí)間太短,前一次產(chǎn)生的抗體水平較高,會(huì)將后一次接種的疫苗中和,降低疫苗的作用效果;間隔時(shí)間太長(zhǎng),前一次的記憶細(xì)胞減少,使得后一次接種的疫苗產(chǎn)生的免疫加強(qiáng)效果下降
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:23引用:1難度:0.7
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1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過(guò)比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無(wú)關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過(guò)PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測(cè)抗體性質(zhì),他們測(cè)定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
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發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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