如表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點，其中切割位點相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請回答下列問題：

限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ

識別序列及切割位點 G↓GATCC
CCTAG↑G T↓GATCA
ACTAG↑T ↓GATC
CTAG↑ A↓AGCTT
TTCGA↑A

（1）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用
BclⅠ
BclⅠ
和
HindⅢ
HindⅢ
兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過
DNA連接
DNA連接
酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒，需將其轉(zhuǎn)入處于
感受
感受
態(tài)的大腸桿菌。
（2）為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加
四環(huán)素
四環(huán)素
，平板上長出的菌落，常用PCR鑒定，所用的引物組成為圖2中
引物甲和引物丙
引物甲和引物丙
。
（3）若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接，連接部位的6個堿基對序列為
，對于該部位，這兩種酶
都不能
都不能
（填“都能”“都不能”或“只有一種能”）切開。
（4）若用Sau3AⅠ切圖1質(zhì)粒最多可能獲得
7
7
種大小不同的DNA片段。

【答案】BclⅠ；HindⅢ；DNA連接；感受；四環(huán)素；引物甲和引物丙；菁優(yōu)網(wǎng)

；都不能；7

【解答】

【點評】

聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。

發(fā)布：2024/5/1 8:0:8組卷：6引用：1難度：0.5

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1．胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中，進(jìn)行了一系列實驗?；卮鹣铝袉栴}：
（1）研究人員利用PCR技術(shù)特異性地擴(kuò)增目的基因的前提是需要

，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了

。
（2）獲取目的基因后，為了構(gòu)建基因表達(dá)載體，還需要使用的酶是

（答出2種）。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、

（答出3種）等結(jié)構(gòu)。
（3）研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行了檢測，相關(guān)步驟和實驗結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是

。據(jù)表分析，該實驗結(jié)果說明

。

組別實驗步驟實驗結(jié)果

① ② ③

轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組）離心收集三組細(xì)
胞制備可溶性蛋
白質(zhì)樣品將TI注射到大白
兔體內(nèi)，獲取TI
抗體讓TI抗體和樣品
進(jìn)行混合檢測有雜交帶

非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組）無雜交帶

陽性對照組（C組）有雜交帶

發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7

A．科學(xué)家已對Bt基因的序列信息、表達(dá)產(chǎn)物等有了較為深入的了解

B．篩選Bt基因后可以利用PCR技術(shù)對其進(jìn)行大量的擴(kuò)增

C．培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的核心工作是將Bt基因?qū)朊藁?xì)胞中

D．檢查轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否培育成功首先要進(jìn)行分子水平的檢測

發(fā)布：2024/11/4 19:0:2組卷：1引用：1難度：0.7

A．DNA連接酶的作用是將兩個黏性末端的堿基連接起來

B．目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，受體細(xì)胞即發(fā)生基因突變

C．目的基因與運載體結(jié)合的過程發(fā)生在細(xì)胞外

D．常使用的運載體有大腸桿菌、噬菌體和動植物病毒等

發(fā)布：2024/11/3 12:0:2組卷：3引用：1難度：0.7

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限制酶	BamHⅠ	BclⅠ	Sau3AⅠ	HindⅢ
識別序列及切割位點	G↓GATCC CCTAG↑G	T↓GATCA ACTAG↑T	↓GATC CTAG↑	A↓AGCTT TTCGA↑A