有研究表明,查爾酮異構(gòu)酶(CHI)普遍存在于高等植物中,該酶可以提高植物的耐鹽脅迫性。如圖所示,科研人員將CHI基因與某質(zhì)粒構(gòu)成基因表達(dá)載體,并導(dǎo)入釀酒酵母中,使釀酒酵母的耐鹽性也大大提高?;卮鹨韵孪嚓P(guān)問(wèn)題:
注:EcoRⅠ、KpnⅠ和PstⅠ是三種限制酶,箭頭表示酶的切割位點(diǎn)。
(1)CHI基因在高等植物細(xì)胞和酵母細(xì)胞中均能表達(dá)出CHI,說(shuō)明上述兩類細(xì)胞在翻譯時(shí)共用
同一套遺傳密碼
同一套遺傳密碼
。
(2)圖7中所示質(zhì)粒上的卡那霉素抗性基因可作為 標(biāo)記基因
標(biāo)記基因
。為構(gòu)建符合要求的基因表達(dá)載體,需要使用兩種限制酶,這兩種限制酶是 Kpn I、Pst I
Kpn I、Pst I
;使用這兩種限制酶進(jìn)行酶切是為了保證 CHI基因與載體質(zhì)粒正確連接
CHI基因與載體質(zhì)粒正確連接
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(3)為了提高基因表達(dá)載體導(dǎo)入酵母細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率,常采用的方法是 用Ca2+( CaCl2溶液)處理酵母細(xì)胞
用Ca2+( CaCl2溶液)處理酵母細(xì)胞
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(4)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因酵母細(xì)胞具有耐鹽脅迫特性的簡(jiǎn)便方法是 在轉(zhuǎn)基因酵母細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入滅菌的高濃度NaCl溶液,觀察酵母菌在高鹽培養(yǎng)基上是否能夠形成菌落
在轉(zhuǎn)基因酵母細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入滅菌的高濃度NaCl溶液,觀察酵母菌在高鹽培養(yǎng)基上是否能夠形成菌落
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