鹽脅迫會影響植物的生長,可用轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高植物的耐鹽能力。mybx是響應(yīng)鹽脅迫的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子,其功能缺失突變體對150mmol?L-1的NaCl高度敏感。HKT1基因表達的Na+轉(zhuǎn)運蛋白介導(dǎo)Na+從木質(zhì)部導(dǎo)管到木質(zhì)部薄壁細胞的運輸,減少木質(zhì)部的Na+含量,從而提高植物的耐鹽能力??蒲腥藛T構(gòu)建HKT1基因的表達載體獲得HKT1基因表達菌體,構(gòu)建過程如圖所示。四種限制酶的識別序列及切割位點如表所示?;卮鹣铝袉栴}:
限制酶 | HindⅢ | BamHⅠ | XhoⅠ | BglⅡ |
識別序列及切割位點 | A↓AGCTT | G↓GATCC | C↓TCGAG | A↓GATCT |
RNA酶抑制劑
RNA酶抑制劑
,以防止RNA降解。過程③要選擇合適的限制酶切割含HKT1基因的DNA片段,應(yīng)選用的表中的限制酶是 HindⅢ、XhoI
HindⅢ、XhoI
。(2)過程⑤將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌。在篩選含有HKT1基因的大腸桿菌時,除必要的營養(yǎng)物質(zhì),還需要在培養(yǎng)基中添加
卡那霉素
卡那霉素
。提取重組質(zhì)粒A將其導(dǎo)入農(nóng)桿菌,用農(nóng)桿菌侵染擬南芥mybz突變體花序,農(nóng)桿菌的作用是 攜帶HKT1基因進入擬南芥細胞,并使HKT1基因在細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達
攜帶HKT1基因進入擬南芥細胞,并使HKT1基因在細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達
。(3)檢測轉(zhuǎn)HKT1基因擬南芥mybr突變株是否表達出Na+轉(zhuǎn)運蛋白時,可用
抗原―抗體雜交
抗原―抗體雜交
技術(shù)進行檢測。若Na+轉(zhuǎn)運蛋白高度表達,還需要進一步鑒定其抗性程度,實驗的思路是 將轉(zhuǎn)基因突變株種植在施加了濃度為150mmol?L-1的NaCl溶液的土壤中,檢測木質(zhì)部薄壁細胞的含鹽量和植株的生長狀況
將轉(zhuǎn)基因突變株種植在施加了濃度為150mmol?L-1的NaCl溶液的土壤中,檢測木質(zhì)部薄壁細胞的含鹽量和植株的生長狀況
。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】RNA酶抑制劑;HindⅢ、XhoI;卡那霉素;攜帶HKT1基因進入擬南芥細胞,并使HKT1基因在細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達;抗原―抗體雜交;將轉(zhuǎn)基因突變株種植在施加了濃度為150mmol?L-1的NaCl溶液的土壤中,檢測木質(zhì)部薄壁細胞的含鹽量和植株的生長狀況
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/25 8:0:9組卷:41引用:6難度:0.6
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發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6 -
2.煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟作物之一,提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟收入。我國科研團隊研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種,抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程(①~⑤)如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
(2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
(3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
(4)⑤過程需要用到發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5 -
3.如表為5種限制酶的識別序列及切割位點,如圖為某種質(zhì)粒和目的基因,箭頭所指為限制酶酶切位點?,F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中,以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是( )
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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