人體肝臟細(xì)胞中的乙醛脫氫酶2（ALDH2）是人體酒精代謝中的關(guān)鍵酶。如圖表示利用基因工程生產(chǎn)ALDH2過程中使用的質(zhì)粒及目的基因的部分結(jié)構(gòu)，β-半乳糖苷酶能分解無色的X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。圖中氨芐青霉素抗性基因、β-半乳糖苷酶基因、目的基因的序列中分別含有1種、5種、2種限制酶的識別序列及切割位點。
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時一般至少需要兩種限制酶，以防止 質(zhì)?；蚰康幕蜃陨憝h(huán)化質(zhì)?；蚰康幕蜃陨憝h(huán)化和 目的基因與質(zhì)粒反向連接目的基因與質(zhì)粒反向連接。設(shè)計啟動子的作用是 使目的基因正常轉(zhuǎn)錄（表達(dá)）使目的基因正常轉(zhuǎn)錄（表達(dá)）。
（2）為了使目的基因與載體能正確連接，應(yīng)在擴(kuò)增的目的基因A、B兩端分別引入 XhoⅠXhoⅠ和 MunⅠMunⅠ兩種不同限制酶的識別序列。
（3）MunⅠ酶切后的末端與EcoRⅠ酶切后的末端能連接，原因是 MunⅠ酶與EcoRI酶切后的黏性末端相同（可以互補(bǔ)配對）MunⅠ酶與EcoRI酶切后的黏性末端相同（可以互補(bǔ)配對）。
（4）以大腸桿菌為受體細(xì)胞，在篩選插入ALDH2基因成功的受體細(xì)胞時，除營養(yǎng)物質(zhì)外，還要在培養(yǎng)基中加入的物質(zhì)有 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal。
（5）研究發(fā)現(xiàn)如果將ALDH2的第36位的氨基酸替換，可提高其催化效率。請寫出通過蛋白質(zhì)工程技術(shù)獲取高效ALDH2基因的操作流程：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能（高效ALDH2）出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)（高效ALDH2結(jié)構(gòu)）→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能（高效ALDH2）出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)（高效ALDH2結(jié)構(gòu)）→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】質(zhì)粒或目的基因自身環(huán)化；目的基因與質(zhì)粒反向連接；使目的基因正常轉(zhuǎn)錄（表達(dá)）；XhoⅠ；MunⅠ；MunⅠ酶與EcoRI酶切后的黏性末端相同（可以互補(bǔ)配對）；氨芐青霉素和X-gal；從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能（高效ALDH2）出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)（高效ALDH2結(jié)構(gòu)）→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/12/7 0:0:1組卷：8引用：2難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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