營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后，微生物細胞代謝調節(jié)機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應不能進行的菌株。這種菌株在基本培養(yǎng)基中不能生長，但能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產物，為工業(yè)生產提供大量原料。以下是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。
（1）過程①的接種方法為 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法。圖中基本培養(yǎng)基與完全培養(yǎng)基存在差異的成分是 氨基酸氨基酸。根據(jù)用途分類，圖中基本培養(yǎng)基屬于 現(xiàn)在現(xiàn)在（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基。
（2）進行過程②培養(yǎng)時，應先將絲絨布轉印至 基本基本（填“基本”或“完全”）培養(yǎng)基上，原因是 防止將特定營養(yǎng)成分從完全培養(yǎng)基帶入基本培養(yǎng)基防止將特定營養(yǎng)成分從完全培養(yǎng)基帶入基本培養(yǎng)基。
（3）利用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是不同培養(yǎng)基中同種菌株的接種位置相同，所以，挑取 菌落A菌落A（填“菌落A”或“菌落B”）即為所需的氨基酸缺陷型菌株。
（4）分離計數(shù)土壤中自然突變的氨基酸缺陷型菌株的過程步驟①取5g土壤加入45mL無菌水中充分振蕩得到土壤懸液。步驟②中，將1mL土壤懸液進行梯度稀釋，每種稀釋度經過步驟③各在3個平板上接種（每個平板的接種量為0.2mL），經適當培養(yǎng)后，在稀釋倍數(shù)為103和104兩組平板上的菌落數(shù)分別為49、47、48和2、7、6。據(jù)此可得出每升土壤懸液中的活菌數(shù)為 2.4×1082.4×108個。接種后的平板應 倒置倒置，以防止冷凝水滴落造成污染。
【答案】稀釋涂布平板法；氨基酸；現(xiàn)在；基本；防止將特定營養(yǎng)成分從完全培養(yǎng)基帶入基本培養(yǎng)基；菌落A；2.4×108；倒置
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：24引用：2難度：0.7
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1．目前全球肆虐的病毒是一種以前尚未在人類中發(fā)現(xiàn)的新型冠狀病毒，命名為2019-nCoV（以下簡稱nCoV）。它具有已知RNA病毒中最大的基因組，單鏈RNA大小為3萬個堿基左右。結構如圖。
疫苗預防
針對該病毒現(xiàn)在還沒有具有針對性的特效藥，因此各國都寄希望于研制出針對該病毒的疫苗。疫苗分為以下5種：滅活疫苗，減毒活疫苗，重組蛋白疫苗，核酸疫苗，重組病毒載體疫苗。
（1）重組蛋白疫苗：中科院微生物所動物試驗階段
可以讓大腸桿菌表達出nCoV的S蛋白，打進人體，讓免疫系統(tǒng)針對該蛋白產生抗體。該過程需要將S蛋白基因轉入大腸桿菌體內，你認為對該過程描述合理的是（多選）
A．用PCR可以短時間獲得大量的S蛋白基因，根據(jù)需要在基因兩端加上的限制性酶切位點可以不同
B．該過程的表達載體上要具有復制原點、起始密碼子、終止密碼子、抗生素抗性基因和S蛋白基因
C．通過Ca2+處理大腸桿菌以獲得感受態(tài)細胞，該狀態(tài)的細胞能夠提高表達載體整合到擬核上的效率
D．能夠利用大腸桿菌DNA擴增出目的基因，說明成功導入了S蛋白基因，是否表達S蛋白還需要抗體檢測
（2）獲得的工程菌需要篩選才能投入疫苗的生產，下列于此過程有關表述正確的是（多選）
A．篩選和鑒定菌種要在培養(yǎng)基中加入瓊脂，大腸桿菌在伊紅美藍培養(yǎng)基上會出現(xiàn)黑色菌落
B．培養(yǎng)基配制過程要稱量、溶化、滅菌，倒平板之前調節(jié)pH值到適宜范圍以利于細菌繁殖
C．如果需要計數(shù)，則用稀釋涂布平板法涂布平板之后對菌落計數(shù)，顯微鏡直接觀察值可能偏小
D．將高產S蛋白的菌種保存起來可以用4℃臨時保藏和-20℃甘油管藏等方法，后者保存時間長
（3）工程菌操作整個過程需要嚴格的無菌操作，下列無菌操作方式合理的有（多選）
A．每次使用接種環(huán)前后都要進行灼燒滅菌，但是灼燒之后要置于菌液冷卻才能使用
B．液體培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌，加了瓊脂的固體培養(yǎng)基可以用干熱滅菌箱滅菌
C．操作者雙手應該用酒精擦拭消毒，但是該過程不能完全殺死微生物的芽孢和孢子
D．倒平板凝固后要將培養(yǎng)皿倒置，目的是防止水分過快蒸發(fā)以及冷凝水回滴造成污染
（4）核酸疫苗：美國人體試驗階段（未做動物試驗）
將S蛋白對應的mRNA用脂膜包裹打進人體，讓它在細胞里表達病毒的S蛋白。以下對該方法的誤解是（多選）
A．核酸注入人體細胞只會造成體細胞的遺傳物質發(fā)生變化，并不影響生殖細胞
B．該過程流程大大簡化，節(jié)省了重組蛋白疫苗的生產S蛋白的時間
C．mRNA如果成功進入細胞，翻譯產生的S蛋白就可以在細胞內對抗病毒
D．核酸外脂膜與細胞膜融合，幫助核酸進入細胞指導S蛋白的翻譯
（5）重組病毒載體疫苗：軍事科學院臨床Ⅱ期階段（動物試驗和臨床Ⅰ期完成）
是把nCoV的部分基因植入到不致病但侵染能力很強的腺病毒載體里，重組成新病毒。任何疫苗在大規(guī)模使用前，最好通過動物試驗再進行臨床試驗。大規(guī)模試驗用哺乳動物一般用小鼠，但是小鼠沒有人類ACE2蛋白，因此獲得大量人源ACE2轉基因小鼠成為動物疫苗試驗的重要步驟。在此過程中下 列表述合理的是（多選）
A．鑒于人類基因組測序已經完成，既可以從人類基因組文庫中獲取目的基因，又可以從cDNA文庫中獲取
B．鑒于小鼠也是真核生物，既可以將人類ACE2完整的基因導入小鼠體內，又可以導入無內含子的目 的基因
C．鑒于受體細胞是小鼠的受精卵細胞，重組DNA分子導入最好用顯微注射的方法，該方法不適合原核生物細胞
D．如果有轉人源ACE2基因小鼠若干，要在短時間獲得大量實驗小鼠，可用核移植的方法克隆很多小鼠發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：14引用：1難度：0.6 -
2．某種物質S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y。回答下列問題：
（1）乙培養(yǎng)基中的Y物質是。甲、乙培養(yǎng)基均屬于培養(yǎng)基。
（2）實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2×107個/mL，若要在每個平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則至少應將搖瓶M中的菌液稀釋倍。
（3）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是（答出1點即可）。
（4）上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養(yǎng)物質，即。發(fā)布：2024/12/27 8:0:2組卷：5引用：2難度：0.7 -
3．致病菌與抗生素。
結核病是由結核分枝桿菌引起的傳染病。 結核分枝桿菌的細胞壁厚脂質含量高，能抵御不利自然環(huán)境，在干痰中可存活 6-8 個月，若黏附于塵埃上可保持傳染性 8-10 天。人體被感染后結核分枝桿菌可侵犯全身各組織器官，但以肺部感染最多。
（1）結核病的傳播途徑主要是。
A、空氣傳播 B、接觸傳播 C、媒介物傳播 D、病媒傳播
（2）根據(jù)病原菌在體內的感染部位，推測結核分枝桿菌的代謝方式是。
A、異養(yǎng)厭氧型 B、自養(yǎng)厭氧型 C、自養(yǎng)好氧型 D、異養(yǎng)好氧型
為探究不同抗生素對結核分枝桿菌的抑菌效果，研究者從患者體內提取的病原菌進行分離培養(yǎng)。 培養(yǎng)結核分枝桿菌的培養(yǎng)基主要含有天門冬氨酸、甘油、雞蛋黃、KH2PO4、MgSO4等。
（3）此培養(yǎng)基成分中既能作為氮源同時提供生長因子的是。
將分離得到的結核分枝桿菌進行增殖培養(yǎng)后，取細菌培養(yǎng)液 2 滴涂布于固體培養(yǎng)基上，然后將浸有相同濃度不同種類的抗生素圓紙片置于培養(yǎng)基表面，37℃培養(yǎng) 4 周，實驗結果如圖1．其中圓紙片 A、B 分別浸過抗生素 A 和抗生素 B，圓紙片 C 浸過抗生素 A、B 的混合物。圖2是細菌結構示意圖，圖中箭頭表示不同抗生素的作用位置。
（4）欲得到如圖1實驗結果，接種過程用到的實驗器材有（多選）。
（5）實驗中圓紙片 D 用作實驗對照，對圓紙片D的處理方法是。根據(jù)實驗結果，說明圓紙片周圍清晰區(qū)大小與抗生素抑菌效果的關系：，并從抗生素對細菌產生的作用解釋圓紙片C周圍清晰區(qū)大于圓紙片A和B的原因。發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：33引用：1難度：0.6
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