如圖是利用工程菌(大腸桿菌)生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的實(shí)驗(yàn)流程。所用的pBR322質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、EcoR工和HindⅢ的切點(diǎn)各一個(gè),且三種酶切割形成的末端各不相同,而Amp'表示氨芐青霉素抗性基因,Tet'表示四環(huán)素抗性基因。請(qǐng)回答以下相關(guān)問題。
(1)目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因,也可以是一些具有調(diào)控作用調(diào)控作用的因子。過程①所用到的組織細(xì)胞是人垂體組織細(xì)胞人垂體組織細(xì)胞,③過程的目的是將平末端處理為黏性末端將平末端處理為黏性末端,⑤過程常用CaCl2CaCl2溶液處理大腸桿菌。
(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行切割,形成的DNA片段種類有99種,這些種類的DNA片段中含有完整氨芐青霉素抗性基因的DNA片段和四環(huán)素抗性基因的DNA片段分別有33種和33種。
(3)如果只用限制酶 PstⅠ切割 目的基因和質(zhì)粒。完成過程(4)、(⑤)后(受體大腸桿菌不含Amp'、Tet'),將三角瓶?jī)?nèi)的大腸桿菌先接種到甲培養(yǎng)基上,形成菌落后用無菌牙簽挑取培養(yǎng)基甲上的單個(gè)菌落,分別接種到乙和丙兩個(gè)培養(yǎng)基的相同位置上,一段時(shí)間后,菌落的生長(zhǎng)狀況如圖乙、丙所示。接種到甲培養(yǎng)基上的目的是篩選含四環(huán)素抗性基因含四環(huán)素抗性基因的大腸桿菌;接種到培養(yǎng)基乙上的大腸桿菌菌落,能存活的大腸桿菌體內(nèi)導(dǎo)入的是完整的pBR322質(zhì)粒(或含有Ampr、Tetr的質(zhì)粒)完整的pBR322質(zhì)粒(或含有Ampr、Tetr的質(zhì)粒)。含有目的基因的大腸桿菌在培養(yǎng)基乙和丙上的生存情況是在丙中能存活,在乙中不能存活在丙中能存活,在乙中不能存活。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】調(diào)控作用;人垂體組織細(xì)胞;將平末端處理為黏性末端;CaCl2;9;3;3;含四環(huán)素抗性基因;完整的pBR322質(zhì)粒(或含有Ampr、Tetr的質(zhì)粒);在丙中能存活,在乙中不能存活
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:35引用:2難度:0.7
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