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如圖是利用工程菌(大腸桿菌)生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素的實(shí)驗(yàn)流程。所用的pBR322質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、EcoR工和HindⅢ的切點(diǎn)各一個(gè),且三種酶切割形成的末端各不相同,而Amp'表示氨芐青霉素抗性基因,Tet'表示四環(huán)素抗性基因。請(qǐng)回答以下相關(guān)問題。
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(1)目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因,也可以是一些具有
調(diào)控作用
調(diào)控作用
的因子。過程①所用到的組織細(xì)胞是
人垂體組織細(xì)胞
人垂體組織細(xì)胞
,③過程的目的是
將平末端處理為黏性末端
將平末端處理為黏性末端
,⑤過程常用
CaCl2
CaCl2
溶液處理大腸桿菌。
(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行切割,形成的DNA片段種類有
9
9
種,這些種類的DNA片段中含有完整氨芐青霉素抗性基因的DNA片段和四環(huán)素抗性基因的DNA片段分別有
3
3
種和
3
3
種。
(3)如果只用限制酶 PstⅠ切割 目的基因和質(zhì)粒。完成過程(4)、(⑤)后(受體大腸桿菌不含Amp'、Tet'),將三角瓶?jī)?nèi)的大腸桿菌先接種到甲培養(yǎng)基上,形成菌落后用無菌牙簽挑取培養(yǎng)基甲上的單個(gè)菌落,分別接種到乙和丙兩個(gè)培養(yǎng)基的相同位置上,一段時(shí)間后,菌落的生長(zhǎng)狀況如圖乙、丙所示。接種到甲培養(yǎng)基上的目的是篩選
含四環(huán)素抗性基因
含四環(huán)素抗性基因
的大腸桿菌;接種到培養(yǎng)基乙上的大腸桿菌菌落,能存活的大腸桿菌體內(nèi)導(dǎo)入的是
完整的pBR322質(zhì)粒(或含有Ampr、Tetr的質(zhì)粒)
完整的pBR322質(zhì)粒(或含有Ampr、Tetr的質(zhì)粒)
。含有目的基因的大腸桿菌在培養(yǎng)基乙和丙上的生存情況是
在丙中能存活,在乙中不能存活
在丙中能存活,在乙中不能存活
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】調(diào)控作用;人垂體組織細(xì)胞;將平末端處理為黏性末端;CaCl2;9;3;3;含四環(huán)素抗性基因;完整的pBR322質(zhì)粒(或含有Ampr、Tetr的質(zhì)粒);在丙中能存活,在乙中不能存活
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:35引用:2難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項(xiàng))等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號(hào))。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
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    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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