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擬南芥的耐寒性與AtCOR15a基因受低溫誘導(dǎo)后表達(dá)的AtCOR15a蛋白相關(guān)。研究人員將該基因作為目的基因培育抗凍的番茄新品種。圖1、圖2分別為構(gòu)建的能夠表達(dá)AtCOR15a的表達(dá)載體及培育流程示意圖,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)要想短時(shí)間內(nèi)獲得大量的AtCOR15a基因所采用的技術(shù)為
PCR
PCR
,該技術(shù)構(gòu)建的反應(yīng)體系中應(yīng)加入
AtCOR15a基因(模板DNA)、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液
AtCOR15a基因(模板DNA)、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液
??赏ㄟ^(guò)PCR技術(shù)在所有DNA分子中專一性擴(kuò)增出AtCOR15a基因,其原因是
引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的
引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的
。
(2)位于AtCOR15a基因上游的RD29A是誘導(dǎo)型啟動(dòng)子,根據(jù)題干信息推測(cè)其在轉(zhuǎn)基因植物中的作用是
使目的基因在低溫條件的誘導(dǎo)下開始轉(zhuǎn)錄
使目的基因在低溫條件的誘導(dǎo)下開始轉(zhuǎn)錄
,表達(dá)載體中nptⅡ基因賦予受體細(xì)胞抗卡那霉素的能力,其作用是
鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)
鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)
。
(3)表達(dá)載體構(gòu)建時(shí),AtCOR15a基因和nptⅡ基因應(yīng)整合在Ti質(zhì)粒的T-DNA內(nèi)部,是因?yàn)?
Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進(jìn)入番茄細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體的DNA中
Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進(jìn)入番茄細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體的DNA中

(4)圖2中擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基類型為
液體
液體
(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基,③④過(guò)程的培養(yǎng)條件是不同的,請(qǐng)列舉兩點(diǎn)
兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對(duì)光照的需求條件也不同
兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對(duì)光照的需求條件也不同
。

【答案】PCR;AtCOR15a基因(模板DNA)、dNTP、引物、Taq酶、緩沖液;引物是根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的;使目的基因在低溫條件的誘導(dǎo)下開始轉(zhuǎn)錄;鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái);Ti質(zhì)粒僅使T-DNA片段可以進(jìn)入番茄細(xì)胞并整合到植物細(xì)胞染色體的DNA中;液體;兩培養(yǎng)基的植物激素比例不同、對(duì)光照的需求條件也不同
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:19引用:1難度:0.7
相似題
  • 菁優(yōu)網(wǎng)1.圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒,其中tar為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因;mel為黑色素合成基因,其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識(shí)別序列?;卮鹣铝袉?wèn)題。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長(zhǎng)狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長(zhǎng);-表示不生長(zhǎng)。
    (1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識(shí)別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質(zhì)粒pIJ702上長(zhǎng)度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進(jìn)行置換,構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長(zhǎng)度見表1。由此判斷目的基因的片段長(zhǎng)度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個(gè)BglⅡ切割位點(diǎn)的理由是
     
    。
    (3)導(dǎo)入目的基因時(shí),首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下可以促進(jìn)鏈霉菌完成
     
    過(guò)程。
    (4)不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上,挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測(cè)整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用,第一步需檢測(cè)受體細(xì)胞的
     
    (填“DNA”或“RNA”),檢測(cè)方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布:2024/11/5 22:30:2組卷:21引用:3難度:0.6
  • 2.胰蛋白酶抑制劑(TI)可抑制昆蟲蛋白酶活性,阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無(wú)細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻,是能在高鹽條件下生長(zhǎng)的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體,并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中,進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)研究人員利用PCR技術(shù)特異性地?cái)U(kuò)增目的基因的前提是需要
     
    ,以便合成引物。PCR過(guò)程中溫度的控制至關(guān)重要,將處理溫度控制在90~95℃,是為了
     
    。
    (2)獲取目的基因后,為了構(gòu)建基因表達(dá)載體,還需要使用的酶是
     
    (答出2種)。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動(dòng)子、
     
    (答出3種)等結(jié)構(gòu)。
    (3)研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行了檢測(cè),相關(guān)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。該檢測(cè)方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析,該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明
     
    組別 實(shí)驗(yàn)步驟 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    轉(zhuǎn)基因鹽藻(A組) 離心收集三組細(xì)
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品
    將TI注射到大白
    兔體內(nèi),獲取TI
    抗體
    讓TI抗體和樣品
    進(jìn)行混合檢測(cè)
    有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻(B組) 無(wú)雜交帶
    陽(yáng)性對(duì)照組(C組) 有雜交帶

    發(fā)布:2024/11/3 15:30:2組卷:5引用:4難度:0.7
  • 3.我國(guó)科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
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