動物血液常常被選作提取血紅蛋白的實驗材料,請回答下列有關(guān)問題:
(1)實驗中樣品處理及粗分離應包括 紅細胞的洗滌紅細胞的洗滌、血紅蛋白釋放、分離血紅蛋白溶液和透析。
(2)下列試劑或儀器可用于血紅蛋白釋放的是 BDFBDF。(多選)
A.0.9%的生理鹽水
B.甲苯
C.磷酸緩沖液
D.蒸餾水
E.離心機
F.磁力攪拌器
(3)凝膠色譜法分離血紅蛋白中使用的凝膠是交聯(lián)葡聚糖凝膠(SephadexG-75),其中G表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及 紅細胞的洗滌紅細胞的洗滌,75的含義是 每克凝膠膨脹時吸水7.5克每克凝膠膨脹時吸水7.5克。填裝凝膠柱時不得有氣泡,原因是 氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)洗脫次序,降低分離效果氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)洗脫次序,降低分離效果。
(4)電泳是分離鑒定蛋白質(zhì)的常用方法。一個蛋白質(zhì)分子在某pH溶液時,蛋白質(zhì)解離成正負離子,當?shù)鞍踪|(zhì)凈電荷為0時對應的溶液pH稱為該蛋白質(zhì)的等電點(pI)。蛋白質(zhì)所處溶液pH>pI時,蛋白質(zhì)帶負電荷,反之帶正電荷(且pH與pI差值越大,帶相應電荷量越大)。如表為幾種血清蛋白的等電點,將血清蛋白在pH=8.6的緩沖液中進行電泳,結(jié)果如圖所示。
蛋白質(zhì)種類 | 清蛋白 | α1球蛋白 | α2球蛋白β | β球蛋白 | γ球蛋白 |
等電點(pI) | 4.84 | 5.06 | 5.06 | 5.12 | 6.8~7.3 |
清蛋白
清蛋白
,α1和α2球蛋白分子量較小的是 α1球蛋白
α1球蛋白
。【答案】紅細胞的洗滌;BDF;紅細胞的洗滌;每克凝膠膨脹時吸水7.5克;氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)洗脫次序,降低分離效果;清蛋白;α1球蛋白
【解答】
【點評】
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