人類乳頭瘤病毒（HPV）有多種亞型，HPV45屬于高危型，與宮頸癌的發(fā)生密切相關。L1蛋白是組成HPV病毒衣殼的主要結(jié)構(gòu)蛋白，科研人員進行了HPV45的抗L1蛋白單克隆抗體的制備與研究?；卮鹣铝袉栴}：
（1）提取HPV45的L1蛋白，注射到小鼠體內(nèi)，其目的是 誘導小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細胞誘導小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細胞。一段時間后，取小鼠脾臟組織，剪碎用 胰蛋白/膠原蛋白酶胰蛋白/膠原蛋白酶酶處理，使其分散成單個細胞制成細胞懸液，與小鼠骨髓瘤細胞誘導融合，篩選出雜交瘤細胞。
（2）將得到的雜交瘤細胞接種到多孔培養(yǎng)板進行 克隆化克隆化培養(yǎng)，分別取其上清液進行 抗體陽性/抗體抗體陽性/抗體檢測，檢測的原理及操作流程如圖1。經(jīng)多次篩選后，取A、B、C、D四種雜交瘤細胞上清液進行檢測，結(jié)果如圖2。
①據(jù)圖分析，實驗過程中需將 L1蛋白L1蛋白作為抗原固定在固相載體上，分別取 不同稀釋倍數(shù)（濃度）的4種雜交瘤細胞上清液和未免疫小鼠血清不同稀釋倍數(shù)（濃度）的4種雜交瘤細胞上清液和未免疫小鼠血清加入反應體系，經(jīng)洗滌后加入酶標抗體形成復合物，再次洗滌，加入相應底物，復合物攜帶的酶可與相應底物反應顯色，測吸光值，顏色越深吸光值越高。
②圖2結(jié)果表明 四種雜交瘤細胞上清液均含有能與L1蛋白結(jié)合的抗體，且上清液A中抗體與L1蛋白結(jié)合能力最強四種雜交瘤細胞上清液均含有能與L1蛋白結(jié)合的抗體，且上清液A中抗體與L1蛋白結(jié)合能力最強。
③依據(jù)圖2結(jié)果，研究人員推測A、B、C、D四種上清液中，A上清液的抗體與L1蛋白結(jié)合的位點是HPV45型病毒識別并侵染人體細胞的關鍵位點。為探究此推測，進行實驗，
實驗步驟如下：
步驟一：將小鼠宮頸細胞懸液均分為四組，編號甲、乙、丙、??；
步驟二：從稀釋倍數(shù)為1：320的A、B、C、D（雜交瘤細胞）上清液中分離提純抗體，分別與HPV45型病毒混合，再加入到小鼠宮頸細胞懸液甲、乙、丙、丁中分別與HPV45型病毒混合，再加入到小鼠宮頸細胞懸液甲、乙、丙、丁中。
步驟三：在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，檢測培養(yǎng)液中被侵染的宮頸細胞比例。實驗預期結(jié)果與結(jié)論：若 甲組中被侵染的宮頸細胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細胞比例高于其他組甲組中被侵染的宮頸細胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細胞比例高于其他組，則推測正確。
（3）科研人員制備HPV45的抗L1蛋白單克隆抗體，在醫(yī)學方面的應用有 用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運載藥物（或診斷試劑、治療疾病、運載藥物）用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運載藥物（或診斷試劑、治療疾病、運載藥物）。
【考點】單克隆抗體及其應用．
【答案】誘導小鼠產(chǎn)生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細胞；胰蛋白/膠原蛋白酶；克隆化；抗體陽性/抗體；L1蛋白；不同稀釋倍數(shù)（濃度）的4種雜交瘤細胞上清液和未免疫小鼠血清；四種雜交瘤細胞上清液均含有能與L1蛋白結(jié)合的抗體，且上清液A中抗體與L1蛋白結(jié)合能力最強；分別與HPV45型病毒混合，再加入到小鼠宮頸細胞懸液甲、乙、丙、丁中；甲組中被侵染的宮頸細胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細胞比例高于其他組；用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運載藥物（或診斷試劑、治療疾病、運載藥物）
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/5 8:0:9組卷：2引用：2難度：0.6
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1．為實現(xiàn)對肝癌的有效治療，研究人員通過比較肝腫瘤細胞和正常細胞間的差異，篩選有效的免疫治療靶點，制備相應單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
（1）檢測發(fā)現(xiàn)細胞的CLDN6蛋白能夠促進腫瘤發(fā)生，選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白，包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)，制備免疫小鼠所用的抗原時，應提取區(qū)基因序列用于設計抗原。
（2）將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi)，從該小鼠脾臟中獲取細胞，誘導其與骨髓瘤細胞融合，利用篩選得到雜交瘤細胞，經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測，多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞，最終通過體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
（3）將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物（CLDN6-DMI）。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI（無關抗體-DMI）分別處理高表達CLDN6細胞和低表達CLDN6細胞，檢測細胞活力，結(jié)果如圖1：
由圖可知，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞，依據(jù)是。
（4）如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制：由圖分析，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞的原因是。發(fā)布：2024/12/19 7:0:1組卷：3引用：1難度：0.6 -
2．2020年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實驗材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實驗流程。下列敘述錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/19 6:0:1組卷：42引用：2難度：0.6 -
3．為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用，某研究團隊對鼠源單克隆抗體F進行改造，制備了人—鼠嵌合抗體F′，具體流程為：提取鼠源雜交瘤細胞RNA，逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴增抗體F的基因序列，將其部分序列用人的相應抗體基因序列進行替換，再構(gòu)建表達載體，在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì)，他們測定了F′單獨與抗原作用時對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時與抗原作用（F′與F初始濃度相同）時F′對抗原的結(jié)合能力，結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/19 1:0:1組卷：39引用：4難度：0.5
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