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人乳鐵蛋白是一種也要的藥用保健蛋白。如圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的過(guò)程，圖中Tet^r表示四環(huán)素抗性基因，Amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，五種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示，請(qǐng)回答以下問(wèn)題：

限制酶 BamHⅠ HaeⅢ BclⅠ Sau3AⅠ NotⅠ

識(shí)別序列
及切割位點(diǎn)

（1）要將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒，若只允許使用一種限制酶，應(yīng)選擇的限制酶是
Sau3AⅠ
Sau3AⅠ
，酶能起催化作用的原理是
可以顯著降低化學(xué)反應(yīng)的活化能
可以顯著降低化學(xué)反應(yīng)的活化能
。
（2）據(jù)圖分析，篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞首先需要在含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
（填“四環(huán)素”、“氨芐青霉素”或“四環(huán)素或氨芐青霉素”）的培養(yǎng)基上進(jìn)行，原因是
用限制酶切割后破壞了Tet^r基因，但不會(huì)破壞Amp^r基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞（對(duì)氨芐青霉素具有抗性），能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來(lái)
用限制酶切割后破壞了Tet^r基因，但不會(huì)破壞Amp^r基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞（對(duì)氨芐青霉素具有抗性），能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來(lái)
。
（3）若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接起來(lái)，連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為
，對(duì)于該部位，這兩種酶
都不能
都不能
（填“都不能”或“只有一種能”）切開。
（4）培養(yǎng)出早期胚胎后，科學(xué)家欲進(jìn)行胚胎分割移植，則應(yīng)該選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的
桑葚胚或囊胚
桑葚胚或囊胚
，將其移入盛有操作液的培養(yǎng)皿中，然后用分割針進(jìn)行分割。

【答案】Sau3AⅠ；可以顯著降低化學(xué)反應(yīng)的活化能；氨芐青霉素；用限制酶切割后破壞了Tet^r基因，但不會(huì)破壞Amp^r基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞（對(duì)氨芐青霉素具有抗性），能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來(lái)；菁優(yōu)網(wǎng)

；都不能；桑葚胚或囊胚

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：15引用：3難度：0.6

相似題

1．運(yùn)用現(xiàn)代生物技術(shù)的育種方法，將抗菜青蟲的Bt基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中，培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲的油菜品種，這一品種在生長(zhǎng)過(guò)程中能產(chǎn)生特異的殺蟲蛋白質(zhì)，對(duì)菜青蟲有顯著抗性，能大大減輕菜青蟲對(duì)油菜的危害，提高油菜產(chǎn)量，減少農(nóng)藥使用，據(jù)以上信息，下列敘述正確的是（　?。?/h2>

A．Bt基因的化學(xué)成分是蛋白質(zhì)

B．Bt基因中有菜青蟲的遺傳物質(zhì)

C．轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜能產(chǎn)生殺蟲蛋白是由于具有Bt基因

D．轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜產(chǎn)生的殺蟲蛋白是無(wú)機(jī)物

發(fā)布：2024/11/7 11:0:1組卷：104引用：32難度：0.7

解析

2．圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒，其中tar為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識(shí)別序列。回答下列問(wèn)題。
表1

pU702pZHZ8

BglI5.7kb6.7kb

表2

固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL） 0 1 2 5 10

不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長(zhǎng)狀況 +++++ +++ + - -

+表示生長(zhǎng)；-表示不生長(zhǎng)。
（1）限制性核酸內(nèi)切酶可以識(shí)別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的

斷裂，切割形成的末端有

兩種。
（2）以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因，與質(zhì)粒pIJ702上長(zhǎng)度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進(jìn)行置換，構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長(zhǎng)度見(jiàn)表1。由此判斷目的基因的片段長(zhǎng)度為

kb,判定目的基因中含有一個(gè)BglⅡ切割位點(diǎn)的理由是

。
（3）導(dǎo)入目的基因時(shí)，首先用Ca²⁺處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下可以促進(jìn)鏈霉菌完成

過(guò)程。
（4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在

μg/mL以上，挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是

。若要檢測(cè)整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用，第一步需檢測(cè)受體細(xì)胞的

（填“DNA”或“RNA”），檢測(cè)方法應(yīng)采用

技術(shù)。

發(fā)布：2024/11/5 22:30:2組卷：21引用：3難度：0.6

解析

3．在碳反應(yīng)中，RuBP羧化酶（R酶）可以催化CO₂的固定，R酶由大亞基蛋白（L）和小亞基蛋白（S）組成。高等植物細(xì)胞中L由葉綠體基因編碼并在葉綠體中合成，S由細(xì)胞核基因編碼并在細(xì)胞溶膠中的核糖體合成后進(jìn)入葉綠體，與L組裝成有功能的酶。研究發(fā)現(xiàn)，原核生物藍(lán)藻（藍(lán)細(xì)菌）R酶的活性高于高等植物。研究人員將藍(lán)藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物（甲）的葉綠體DNA中，同時(shí)去除甲的L基因。轉(zhuǎn)基因植株能夠存活生長(zhǎng)。檢測(cè)結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因植株中的R酶活性高于未轉(zhuǎn)基因的正常植株。下列有關(guān)敘述正確的是（　?。?/h2>

A．R酶在藍(lán)細(xì)菌與甲的葉肉細(xì)胞中組裝的位置是相同的

B．轉(zhuǎn)基因植株中有活性的R酶是由藍(lán)藻的S、L蛋白組裝而成的

C．由于R酶活性增強(qiáng)，轉(zhuǎn)基因植株的碳反應(yīng)速率提高，但光反應(yīng)速率不變

D．藍(lán)藻L基因可在甲的葉綠體中表達(dá)，是因?yàn)樯锝绻灿靡惶走z傳密碼子

發(fā)布：2024/11/7 8:0:2組卷：5引用：1難度：0.5

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限制酶	BamHⅠ	HaeⅢ	BclⅠ	Sau3AⅠ	NotⅠ
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)

固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL）	0	1	2	5	10
不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長(zhǎng)狀況	+++++	+++	+	-	-