圖1是某基因工程中構建重組質粒的過程示意圖,載體質粒PO具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請回答下列問題:
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(1)用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得的目的基因片段,其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸。線性載體P1經(jīng)酶處理,在其兩端各添加了一個 胸腺嘧啶胸腺嘧啶,形成線性載體P2。
(2)為篩選出含有重組質粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板進行篩選,得到A、B、C三類菌落,其生長情況如下表(“+”代表生長,“-”代表不生長)。根據(jù)表中結果判斷,應選擇的菌落是 BB(填表中字母)類,另外兩類菌落質粒導入情況分別是 A類菌落含有P0、C類菌落未轉入質粒A類菌落含有P0、C類菌落未轉入質粒。
菌落類型 平板類型 |
A | B | C |
無抗生素 | + | + | + |
氨芐青霉素 | + | + | - |
四環(huán)素 | + | - | - |
氨芐青霉素+四環(huán)素 | + | - | - |
乙和丙
乙和丙
。小明同學用圖中某對引物從一個菌落的質粒中擴增出了400bp片段,請分析出現(xiàn)這種結果的原因:目的基因反向連接
目的基因反向連接
。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】胸腺嘧啶;B;A類菌落含有P0、C類菌落未轉入質粒;乙和丙;目的基因反向連接
【解答】
【點評】
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