胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應器。研究人員利用基因工程技術構建TI基因的表達載體，并將其導入鹽藻細胞中，進行了一系列實驗。回答下列問題：
（1）研究人員利用PCR技術特異性地擴增目的基因的前提是需要 一段已知目的基因的核苷酸序列一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了 使DNA解鏈使DNA解鏈。
（2）獲取目的基因后，為了構建基因表達載體，還需要使用的酶是 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶（答出2種）。構建成功的基因表達載體應含有的結構有目的基因、啟動子、終止子、標記基因、復制原點終止子、標記基因、復制原點（答出3種）等結構。
（3）研究人員將TI基因?qū)胧荏w細胞后進行了檢測，相關步驟和實驗結果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是 抗原和抗體的特異性識別與結合抗原和抗體的特異性識別與結合。據(jù)表分析，該實驗結果說明 TI基因在轉(zhuǎn)基因鹽藻細胞內(nèi)成功表達TI基因在轉(zhuǎn)基因鹽藻細胞內(nèi)成功表達。
| 組別 | 實驗步驟 | 實驗結果 | ||
| ① | ② | ③ | ||
| 轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組） | 離心收集三組細 胞制備可溶性蛋 白質(zhì)樣品 |
將TI注射到大白 兔體內(nèi)，獲取TI 抗體 |
讓TI抗體和樣品 進行混合檢測 |
有雜交帶 |
| 非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組） | 無雜交帶 | |||
| 陽性對照組（C組） | 有雜交帶 | |||
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】一段已知目的基因的核苷酸序列；使DNA解鏈；限制酶、DNA連接酶；終止子、標記基因、復制原點；抗原和抗體的特異性識別與結合；TI基因在轉(zhuǎn)基因鹽藻細胞內(nèi)成功表達
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應用的生物技術有（答出2項）等。
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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