基因測序技術(shù)在臨床和科研中發(fā)揮著越來越重要的作用，該技術(shù)通常包括核酸提取、核酸擴增、產(chǎn)物檢測3個步驟。
（1）已知SDS（十二烷基硫酸鈉）可以使蛋白質(zhì)變性，在利用真核生物做材料進(jìn)行DNA粗提取時，通常在研磨液中加入SDS的目的是

使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離

使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離

。DNA粗提取過程中常用到體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精，其作用是

分離DNA和蛋白質(zhì)

分離DNA和蛋白質(zhì)

。
（2）測序技術(shù)通常需要用PCR技術(shù)擴增待測分子。如表是某研究小組設(shè)計的兩組引物，其中不合理的是

B

B

，原因是

引物太短、特異性弱；兩個引物會互補結(jié)合

引物太短、特異性弱；兩個引物會互補結(jié)合

。

引物	序列
A	5′-GCCCTCTACTCCCCGGTCTTG-3′ 5′-GCCCATCTGCAAGTTATCCTA-3′
B	5′-GGGATT-3′ 5′-AATCCC-3

（3）第一代測序技術(shù)又叫雙脫氧鏈終止法，它以DNA合成反應(yīng)為基礎(chǔ)。如圖是該技術(shù)的測序原理和某待測DNA序列的電泳圖譜。在反應(yīng)體系中加入dNTP（2′，3′-雙脫氧核苷三磷酸）的作用是

dNTP的3'端不能形成磷酸二酯鍵導(dǎo)致復(fù)制停止，形成長短不一的DNA片段

dNTP的3'端不能形成磷酸二酯鍵導(dǎo)致復(fù)制停止，形成長短不一的DNA片段

。據(jù)圖分析，待測DNA片段的堿基序列是3′

-GACTGCCA-或-TGGCAGTC-

-GACTGCCA-或-TGGCAGTC-

5′。

（4）第二代測序又稱為高通量測序。二代測序在DNA復(fù)制過程中通過捕捉新添加的堿基所攜帶的特殊標(biāo)記（一般為熒光分子標(biāo)記）來確定DNA的序列。這就要求在測序時，DNA分子必須同步復(fù)制，來增強熒光信號強度從而讀出DNA序列。據(jù)此分析，二代測序技術(shù)不適合測量較

長

長

（填“長”或“短”）的DNA序列，原因是

DNA分子越長，基因復(fù)制的同步性降低，導(dǎo)致堿基測序質(zhì)量下降

DNA分子越長，基因復(fù)制的同步性降低，導(dǎo)致堿基測序質(zhì)量下降

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