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菁優(yōu)網(wǎng)普通酵母菌利用淀粉的效率較低。研究人員將某海洋細(xì)菌中α-淀粉酶分子(B)基因轉(zhuǎn)入酵母菌中,經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)采用PCR技術(shù)擴(kuò)增B基因。圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向,請(qǐng)用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出另一條引物的位置及擴(kuò)增方向。為使PCR產(chǎn)物能被限制酶切割,需在引物上添加相應(yīng)的限制酶識(shí)別序列,該限制酶識(shí)別序列應(yīng)添加在引物的
5'端
5'端
(3′端/5′端)。
(2)通常需提取大腸桿菌的質(zhì)粒用來(lái)構(gòu)建B基因的表達(dá)載體。提取的主要步驟是培養(yǎng)大腸桿菌→裂解菌體→質(zhì)粒DNA的復(fù)性→離心提取→鑒定。在裂解菌體時(shí)需添加溶液(主要成分為EDTA)、溶液Ⅰ(主要成分為SDS),添加順序是先加
溶液Ⅰ
溶液Ⅰ
,5min后再加
溶液Ⅱ
溶液Ⅱ
。在所提取的質(zhì)粒上還需添加
酵母菌
酵母菌
(海洋細(xì)菌/大腸桿菌/酵母菌)的啟動(dòng)子、終止子等。
(3)在將B基因?qū)虢湍讣?xì)胞前,需先將酵母菌置于含醋酸鋰的培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間,從而提高轉(zhuǎn)化效率。由此推測(cè),醋酸鋰的培養(yǎng)液可用于制備
感受態(tài)酵母菌
感受態(tài)酵母菌

(4)用B抗體檢測(cè)該工程菌的培養(yǎng)物時(shí),培養(yǎng)液無(wú)抗原抗體反應(yīng),菌體有抗原抗體反應(yīng)。這為分離、純化B蛋白提供的啟示是
在用該工程菌進(jìn)行工業(yè)發(fā)酵時(shí),應(yīng)從菌體中分離、純化B蛋白
在用該工程菌進(jìn)行工業(yè)發(fā)酵時(shí),應(yīng)從菌體中分離、純化B蛋白
。以淀粉為原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,接種了工程酵母菌的發(fā)酵罐需要率先排氣,其原因是
工程酵母菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng),導(dǎo)致酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO2速率更快
工程酵母菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng),導(dǎo)致酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO2速率更快

(5)如果將B的絲氨酸變成亮氨酸,改變后的α-淀粉酶分子(B)不但保留B的功能,而且具更高的催化活性。以B基因序列為基礎(chǔ),獲得B1基因的途徑有修飾
B
B
基因或合成
B1
B1
基因。

【答案】5'端;溶液Ⅰ;溶液Ⅱ;酵母菌;感受態(tài)酵母菌;在用該工程菌進(jìn)行工業(yè)發(fā)酵時(shí),應(yīng)從菌體中分離、純化B蛋白;工程酵母菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng),導(dǎo)致酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO2速率更快;B;B1
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:11引用:3難度:0.6
相似題
  • 1.利用基因工程生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示,下列敘述不正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/201711/197/1bd70dc0.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布:2024/10/28 21:30:2組卷:25引用:2難度:0.7
  • 2.科學(xué)家對(duì)乳酸脫氫酶(LDH)進(jìn)行了改造,使其能夠高效地生產(chǎn)高純度的苯乳酸。回答下列有關(guān)問(wèn)題:
    (1科學(xué)家改造乳酸脫氫酶時(shí)需要做的第一步是
     
    。研究發(fā)現(xiàn),要將LDH基因改造成為mLDH(改造后的乳酸脫氫酶)基因,需將LDH第52位的酪氨酸替換為亮氨酸,使得活性中心增大,才能用于生產(chǎn)苯乳酸。
    ①先將LDH基因片段連人載體中,形成環(huán)狀質(zhì)粒(如圖1)。
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    將突變后的序列設(shè)計(jì)在引物1中,以環(huán)狀質(zhì)粒為PCR的
     
    ,再向體系中加入四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、
     
    ,以及堿基替換了的引物擴(kuò)增LDH基因,PCR產(chǎn)物的序列便引入了預(yù)期的突變。
    ②上述PCR產(chǎn)物為鏈狀DNA分子,改造后的LDH基因序列位于PCR產(chǎn)物的兩側(cè),需要用
     
    酶將產(chǎn)物兩端連接,獲得含有mLDH基因的質(zhì)粒。
    (2)產(chǎn)生苯乳酸的過(guò)程還需FDH酶參與?,F(xiàn)需要構(gòu)建同時(shí)含有mLDH、FDH的基因表達(dá)載體。請(qǐng)你根據(jù)圖2,提出將兩個(gè)基因依次連入載體的思路:
     
    (要體現(xiàn)選用的內(nèi)切酶和連接的先后順序)。
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    (3)上述科學(xué)實(shí)踐屬于生物工程中的
     
    工程。在生命科學(xué)高速發(fā)展的今天,基因改造已十分成熟,但有一些紅線不能觸碰,請(qǐng)你舉出一例我國(guó)明令禁止的生物工程應(yīng)用:
     

    發(fā)布:2024/10/28 17:0:2組卷:9引用:2難度:0.6
  • 3.我國(guó)科學(xué)家將人類(lèi)的生長(zhǎng)激素(GH)基因?qū)膈庺~(yú)的受精卵,培育出能快速生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/28 17:0:2組卷:9引用:2難度:0.7
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