草銨膦是一種除草劑，在殺死田間雜草的同時也會損傷作物，甚至導(dǎo)致作物死亡。研究人員發(fā)現(xiàn)牽?；?xì)胞中的M基因表達出的M蛋白質(zhì)能夠分解草銨膦，從而表現(xiàn)出對草銨膦具有一定的抗性。欲通過基因工程培育抗草銨膦的轉(zhuǎn)基因玉米，回答下列問題：
（1）獲取目的基因的方法有很多種，在滿足

基因比較小，核苷酸序列又已知

基因比較小，核苷酸序列又已知

條件時可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成。
（2）為了實現(xiàn)M基因在體外的大量擴增，可以采取PCR方法，該方法依據(jù)的原理是

DNA雙鏈復(fù)制

DNA雙鏈復(fù)制

。
（3）如表表示兩種限制酶的識別序列及切割位點：

BamHⅠ	BglⅡ
G↓GATCC CCTAG↑G	A↓GATCT TCTAG↑A

若用BamHⅠ限制酶切割載體，用BglⅡ限制酶切割目的基因，則切割后的載體和目的基因片段

能

能

（填“能”或“否”）直接相連，理由是

產(chǎn)生的黏性末端相同

產(chǎn)生的黏性末端相同

，若能相連，則可以選擇

T₄DNA連接酶或E?coliDNA連接酶

T₄DNA連接酶或E?coliDNA連接酶

（填“T₄DNA連接酶”或“E?coliDNA連接酶”或“T₄DNA連接酶或E?coliDNA連接酶”）。
（4）培育轉(zhuǎn)基因植物時，常將目的基因?qū)胫参锏捏w細(xì)胞，然后再通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)將其培養(yǎng)成植物幼苗，該技術(shù)依據(jù)的原理是

植物細(xì)胞具有全能性

植物細(xì)胞具有全能性

，若從分子水平檢測目的基因在受體細(xì)胞中是否完成了表達，需要提取轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞中的

蛋白質(zhì)

蛋白質(zhì)

。用

抗M蛋白抗體

抗M蛋白抗體

物質(zhì)對其進行檢測，若

形成雜交帶

形成雜交帶

，則說明目的基因完成了表達。