表面展示技術(shù)是通過(guò)重組DNA技術(shù)，將外源蛋白與細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)組裝成融合蛋白，從而可展示在細(xì)胞表面?；卮鹣铝袉?wèn)題。
（1）若要將芽孢表面蛋白基因cotB與外源的綠色熒光蛋白基因gfp構(gòu)建成基因表達(dá)載體，下圖中最適合通過(guò)綠色熒光（綠色熒光蛋白在紫外光下會(huì)產(chǎn)生綠色熒光）確定融合蛋白成功表達(dá)的是

C

C

。

注：Amp^r為氨芐青霉素抗性基因；→表示轉(zhuǎn)錄方向；UAG，UAA，UGA是終止密碼子，AUG是起始密碼子。
（2）芽孢表面蛋白是實(shí)現(xiàn)表面展示技術(shù)的關(guān)鍵蛋白，結(jié)合上述材料，試分析該蛋白在表面展示技術(shù)中的作用是

芽孢表面蛋白是可以定位在細(xì)胞表面的，在與外源蛋白形成融合蛋白后，可將外源蛋白展示/定位在芽孢桿菌表面

芽孢表面蛋白是可以定位在細(xì)胞表面的，在與外源蛋白形成融合蛋白后，可將外源蛋白展示/定位在芽孢桿菌表面

。
（3）導(dǎo)入基因表達(dá)載體后的芽孢桿菌接種在含有

氨芐青霉素

氨芐青霉素

的固體培養(yǎng)基上，以獲得攜帶載體的單菌落，該過(guò)程被稱(chēng)為微生物的

選擇

選擇

培養(yǎng)。
（4）培養(yǎng)基中可能既有含基因表達(dá)載體的單菌落，也有含

空載體

空載體

的單菌落，因此還需要對(duì)DNA進(jìn)行提取，常用酒精初步分離DNA和蛋白質(zhì)，這里酒精的作
用原理是

DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精

DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精

。
（5）若要確定表面展示技術(shù)在芽孢桿菌上構(gòu)建成功，應(yīng)在紫外光環(huán)境下對(duì)其進(jìn)行

個(gè)體

個(gè)體

水平的檢測(cè)。