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孔雀石綠(簡稱MG)是廣泛使用的有機(jī)染料,在自然環(huán)境中極難降解,容易引起土壤污染,進(jìn)而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低,含過量MG的固體培養(yǎng)基不透明。
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(1)培養(yǎng)基的配制:MG降解菌富集培養(yǎng)基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等,再加
孔雀石綠(MG)
孔雀石綠(MG)
作為唯一碳源。配制好的培養(yǎng)基,需用
高壓蒸汽滅菌
高壓蒸汽滅菌
法進(jìn)行滅菌。
(2)MG高效降解菌株的分離和純化:圖中所示的分離純化細(xì)菌的方法是
稀釋涂布平板法
稀釋涂布平板法
,用該方法統(tǒng)計(jì)樣品的菌落數(shù)目比活菌的實(shí)際數(shù)目
(“少”或“多”),原因是
當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落
當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落
。實(shí)驗(yàn)室采用此方法,將1mL樣品稀釋1000倍,在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)正確操作培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為150、158和160。據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)至少為
1.56×109
1.56×109
個(gè)。
(3)MG高效降解菌株的鑒定:將純化獲得的菌種接種于含過量MG的固體培養(yǎng)基(其他營養(yǎng)成分等適宜)上,根據(jù)培養(yǎng)基是否出現(xiàn)
透明圈
透明圈
就可以鑒別出目的菌株,原因是
目的菌株通過降解MG生長,使菌落周圍的培養(yǎng)基變透明,出現(xiàn)透明圈
目的菌株通過降解MG生長,使菌落周圍的培養(yǎng)基變透明,出現(xiàn)透明圈

【答案】孔雀石綠(MG);高壓蒸汽滅菌;稀釋涂布平板法;少;當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落;1.56×109;透明圈;目的菌株通過降解MG生長,使菌落周圍的培養(yǎng)基變透明,出現(xiàn)透明圈
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:11引用:1難度:0.7
相似題
  • 1.近年來,過度依賴提高養(yǎng)殖密度和過量投餌的養(yǎng)殖方式,導(dǎo)致出現(xiàn)養(yǎng)殖環(huán)境生態(tài)失調(diào)、病害頻發(fā)、水資源浪費(fèi)和污染嚴(yán)重等現(xiàn)象。益生菌能夠改善水質(zhì),抑制有害菌的生長,保持微生態(tài)平衡,是水產(chǎn)動(dòng)物防控病害的有效手段之一。研究人員從鯽魚腸道樣品中分離出具有抑菌效果的菌株,為開發(fā)適用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的抑菌類微生態(tài)制劑提供參考。抑菌效果用指示菌(嗜水氣單胞菌、哈維氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌等有害菌)進(jìn)行檢驗(yàn)。用到LB液體培養(yǎng)基:蛋白胨1%、酵母膏0.5%、氯化鈉0.5%、水100mL。請(qǐng)回答下列問題:
    (1)LB液體培養(yǎng)基中的蛋白胨能為微生物提供
     
    ;用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí),水沸騰后,待
     
    ,再關(guān)閉排氣閥。
    (2)將樣品鯽魚腸道內(nèi)容物制成稀釋液,接種至LB液體培養(yǎng)基進(jìn)行富集培養(yǎng),目的是
     
    ;將富集培養(yǎng)液加至LB固體培養(yǎng)基平板,涂布均勻,37℃恒溫培養(yǎng)。配制LB固體培養(yǎng)基時(shí),通常需向LB液體培養(yǎng)基中加入
     
    ;菌落長出后,常采用
     
    法將其轉(zhuǎn)接種到新的平板上進(jìn)一步純化,得到初篩菌株。
    (3)采用打孔法測定初篩菌株的抑菌效果:吸取稀釋好的
     
    菌液0.6mL加入平板;使用2.7mm的直徑打孔器,在平板上垂直均勻打孔,標(biāo)記菌株編號(hào),每孔分別注入10μL
     
    菌液,培養(yǎng)24h。每個(gè)樣品做3個(gè)平板。培養(yǎng)完畢,檢測板上出現(xiàn)抑菌圈,測量
     
    ,取平均值。
    (4)經(jīng)鑒定,菌株YJ4的抑菌效果最好,為進(jìn)一步驗(yàn)證菌株YJ4的安全性,選擇健康鯽魚80尾,隨機(jī)均分為4組。實(shí)驗(yàn)組分別采用腹腔注射法注射0.1mL濃度分別為1×109、1×108和1×107單位/mL的YJ4菌懸液,適宜條件下飼養(yǎng)7d,觀察并記錄實(shí)驗(yàn)魚游動(dòng)、攝食及死亡情況,最后剖檢,觀察有無病變,對(duì)照組的處理為
     

    發(fā)布:2024/11/14 2:0:1組卷:7引用:2難度:0.7
  • 2.我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)“超級(jí)蠕蟲”——黃粉蟲(俗稱面包蟲)可以吃塑料,并從其腸道內(nèi)分離出了能夠降解聚苯乙烯(塑料的主要成分,縮寫PS)的細(xì)菌,為解決全球塑料污染問題打開了一扇新的大門。某科研小組計(jì)劃在實(shí)驗(yàn)室分離純化能高效降解聚苯乙烯的細(xì)菌(目標(biāo)菌),然后獲取相關(guān)酶,以期實(shí)現(xiàn)塑料的生物酶降解。其基本思路如圖1:
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    Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基:水、無機(jī)鹽、氮源、物質(zhì)X
    Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基:水、無機(jī)鹽、氮源、物質(zhì)X、物質(zhì)Y
    (1)物質(zhì)X和物質(zhì)Y分別是
     
     
    。
    (2)除了圖中所示方法外,還可以通過
     
    法在Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上純化降解PS塑料的微生物菌群,使其生長出單個(gè)菌落??蒲腥藛T從中挑選了3株能穩(wěn)定降解PS塑料的菌種P1、P2和P3。
    (3)科研人員將紅色PS粉碎成粉末,均勻混合在無碳固體培養(yǎng)基中,之后再接種經(jīng)過稀釋的三種菌液,一段時(shí)間后可測得透明圈大?。―)與菌圈大小(d)(如圖2所示)。若使用單一菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),應(yīng)選用P1菌種,理由是
     
    。
    (4)為測定PS降解酶降解塑料的能力,需要先將該酶分離出來,常用凝膠色譜法,凝膠色譜法分離PS降解酶的基本過程;樣品加入后進(jìn)行洗脫,而后收集PS降解酶。最后收集到的蛋白質(zhì)樣品與剛洗脫時(shí)收集到的蛋白質(zhì)相比,分子質(zhì)量較
     
    (填大或?。蚴?
     
    。
    (5)分離得到PS降解酶后,為提高生產(chǎn)效率,需要對(duì)酶固定化,可以采用的方法有
     
    。

    發(fā)布:2024/11/13 23:0:1組卷:3引用:3難度:0.6
  • 3.安莎霉素是一類主要由海洋中的稀有放線菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物,具有較高的抗菌活性和藥用價(jià)值。產(chǎn)安莎霉素的放線菌具有一個(gè)普遍的共性——氨基酸缺陷型(不能自身合成某些特定的氨基酸)??蒲腥藛T從深海采集淤泥樣本,再分離、純化并篩選出產(chǎn)安莎霉素的放線菌,過程如圖所示。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(  )
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    發(fā)布:2024/11/14 15:0:1組卷:29引用:3難度:0.5
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