利用轉(zhuǎn)基因的工程菌生產(chǎn)藥用蛋白,近些年在我國制藥行業(yè)中異軍突起。圖1是基因工程常用的一種質(zhì)粒;圖2是利用該質(zhì)粒構(gòu)建的一種基因表達(dá)載體。各限制酶質(zhì)粒上分別只有一處識(shí)別序列,將質(zhì)粒和重組質(zhì)粒用相應(yīng)的限制酶酶切后,得到的DNA片段長度如表中數(shù)據(jù)。請(qǐng)回答下列問題:
質(zhì)粒 | 重組質(zhì)粒 | |
BglⅡ | 6.0kb | 7.1kb |
ClaⅠ | 6.0kb | 2.3kb,4.8kb |
PstⅠ | 6.0kb | 1.5kb,5.6kb |
在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制(或整合到受體DNA上,隨受體DNA同步復(fù)制)、具有標(biāo)記基因、有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)
在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制(或整合到受體DNA上,隨受體DNA同步復(fù)制)、具有標(biāo)記基因、有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)
,而作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有 啟動(dòng)子和終止子
啟動(dòng)子和終止子
。(2)為了獲得更多的目的基因,可用PCR擴(kuò)增,PCR的原理是
DNA的半保留復(fù)制
DNA的半保留復(fù)制
。PCR反應(yīng)體系中加入dNTP后,這些物質(zhì)既可以作為 原料
原料
,也可以為反應(yīng)提供 能量
能量
。(3)PCR中通常會(huì)得到不同的DNA產(chǎn)物,常采用
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
法鑒定,不同DNA片段因 相對(duì)分子質(zhì)量、所帶電荷
相對(duì)分子質(zhì)量、所帶電荷
等不同,在電場中的遷移速率也不同,因而可以形成不同條帶。(4)已知質(zhì)粒被切除的片段長度為0.5kb,則與質(zhì)粒結(jié)合的目的基因長度為
1.6
1.6
kb。質(zhì)粒上ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域之間的長度為2.4kb(如圖1所示),結(jié)合圖2分析,目的基因上ClaⅠ、PstⅠ兩種限制酶的切割位點(diǎn)分別為 a和b
a和b
(在a、b兩點(diǎn)中選填)。(5)培養(yǎng)受體菌時(shí),在培養(yǎng)基中應(yīng)加入適量的
氨芐青霉素
氨芐青霉素
,可以將導(dǎo)入重組質(zhì)粒和普通質(zhì)粒的受體菌都篩選出來。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制(或整合到受體DNA上,隨受體DNA同步復(fù)制)、具有標(biāo)記基因、有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn);啟動(dòng)子和終止子;DNA的半保留復(fù)制;原料;能量;瓊脂糖凝膠電泳;相對(duì)分子質(zhì)量、所帶電荷;1.6;a和b;氨芐青霉素
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/12/14 19:30:1組卷:23引用:2難度:0.6
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