試卷征集
加入會員
操作視頻

利用轉基因的工程菌生產(chǎn)藥用蛋白，近些年在我國制藥行業(yè)中異軍突起。圖1是基因工程常用的一種質(zhì)粒；圖2是利用該質(zhì)粒構建的一種基因表達載體。各限制酶質(zhì)粒上分別只有一處識別序列，將質(zhì)粒和重組質(zhì)粒用相應的限制酶酶切后，得到的DNA片段長度如表中數(shù)據(jù)。請回答下列問題：
菁優(yōu)網(wǎng)
質(zhì)粒 重組質(zhì)粒
BglⅡ 6.0kb 7.1kb
ClaⅠ 6.0kb 2.3kb,4.8kb
PstⅠ 6.0kb 1.5kb,5.6kb
（1）在基因工程中作為載體的質(zhì)粒應具備的基本條件有
在受體細胞中能自我復制（或整合到受體DNA上，隨受體DNA同步復制）、具有標記基因、有一個至多個限制酶切割位點
在受體細胞中能自我復制（或整合到受體DNA上，隨受體DNA同步復制）、具有標記基因、有一個至多個限制酶切割位點
，而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外，還需具有
啟動子和終止子
啟動子和終止子
。
（2）為了獲得更多的目的基因，可用PCR擴增，PCR的原理是
DNA的半保留復制
DNA的半保留復制
。PCR反應體系中加入dNTP后，這些物質(zhì)既可以作為
原料
原料
，也可以為反應提供
能量
能量
。
（3）PCR中通常會得到不同的DNA產(chǎn)物，常采用
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
法鑒定，不同DNA片段因
相對分子質(zhì)量、所帶電荷
相對分子質(zhì)量、所帶電荷
等不同，在電場中的遷移速率也不同，因而可以形成不同條帶。
（4）已知質(zhì)粒被切除的片段長度為0.5kb,則與質(zhì)粒結合的目的基因長度為
1.6
1.6
kb。質(zhì)粒上ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域之間的長度為2.4kb（如圖1所示），結合圖2分析，目的基因上ClaⅠ、PstⅠ兩種限制酶的切割位點分別為
a和b
a和b
（在a、b兩點中選填）。
（5）培養(yǎng)受體菌時，在培養(yǎng)基中應加入適量的
氨芐青霉素
氨芐青霉素
，可以將導入重組質(zhì)粒和普通質(zhì)粒的受體菌都篩選出來。

【答案】在受體細胞中能自我復制（或整合到受體DNA上，隨受體DNA同步復制）、具有標記基因、有一個至多個限制酶切割位點；啟動子和終止子；DNA的半保留復制；原料；能量；瓊脂糖凝膠電泳；相對分子質(zhì)量、所帶電荷；1.6；a和b；氨芐青霉素
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：23引用：2難度：0.6
相似題

  • 1．胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應器。研究人員利用基因工程技術構建TI基因的表達載體，并將其導入鹽藻細胞中，進行了一系列實驗?；卮鹣铝袉栴}：
    （1）研究人員利用PCR技術特異性地擴增目的基因的前提是需要
     
    ，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了
     
    。
    （2）獲取目的基因后，為了構建基因表達載體，還需要使用的酶是
     
    （答出2種）。構建成功的基因表達載體應含有的結構有目的基因、啟動子、
     
    （答出3種）等結構。
    （3）研究人員將TI基因導入受體細胞后進行了檢測，相關步驟和實驗結果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析，該實驗結果說明
     
    。
    組別 實驗步驟 實驗結果
    ① ② ③
    轉基因鹽藻（A組） 離心收集三組細
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品    		 將TI注射到大白
    兔體內(nèi)，獲取TI
    抗體    		 讓TI抗體和樣品
    進行混合檢測    		 有雜交帶
    非轉基因鹽藻（B組） 無雜交帶
    陽性對照組（C組） 有雜交帶

    發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7

  • 菁優(yōu)網(wǎng)2．圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒，其中tar為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?；卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL） 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長；-表示不生長。
    （1）限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂，切割形成的末端有
     
    兩種。
    （2）以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因，與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換，構建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     
    。
    （3）導入目的基因時，首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    （4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導入pZHZ8的鏈霉菌細胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應在
     
    μg/mL以上，挑選成功導入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用，第一步需檢測受體細胞的
     
    （填“DNA”或“RNA”），檢測方法應采用
     
    技術。

    發(fā)布：2024/11/5 22:30:2組卷：21引用：3難度：0.6

  • 3．我國科學家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉基因抗蟲棉，下列說法錯誤的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/4 19:0:2組卷：1引用：1難度：0.7
小程序二維碼
把好題分享給你的好友吧~~
APP開發(fā)者：深圳市菁優(yōu)智慧教育股份有限公司 | 應用名稱：菁優(yōu)網(wǎng) | 應用版本：4.8.2  |  隱私協(xié)議      第三方SDK     用戶服務條款廣播電視節(jié)目制作經(jīng)營許可證出版物經(jīng)營許可證網(wǎng)站地圖本網(wǎng)部分資源來源于會員上傳，除本網(wǎng)組織的資源外，版權歸原作者所有，如有侵犯版權，請立刻和本網(wǎng)聯(lián)系并提供證據(jù)，本網(wǎng)將在三個工作日內(nèi)改正