新型冠狀病毒的檢測方法很多,實時熒光RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是目前核酸檢測的主要方法,操作流程:采集樣本→提取RNA→逆轉(zhuǎn)錄成cDNA→PCR擴增→結(jié)果分析。
技術(shù)操作流程如下,回答下列問題。
注:Q:信號淬滅劑,R:熒光信號劑
既有Q又有R的探針檢測不到熒光。
(1)①過程需要
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶,③過程中對兩種引物的要求是 兩種引物不能互相配對;足夠長一般為20~30個核苷酸;與目的基因兩端互補
兩種引物不能互相配對;足夠長一般為20~30個核苷酸;與目的基因兩端互補
(回答1點即可)。
(2)核酸檢測通常選取新冠病毒cDNA中的ORFlab基因的原因是 特異性強,結(jié)構(gòu)穩(wěn)定
特異性強,結(jié)構(gòu)穩(wěn)定
。若加入的熒光基因探針序列為:5'-TTGCT……AGATT-3',如果樣本中存在該基因序列,與探針結(jié)合的序列應(yīng)該是5′-AATCT……AGCAA-
-AATCT……AGCAA-
3′。若某人感染新冠病毒,則其樣本經(jīng)圖示流程處理后,最終 能
能
(填“不能”或“能”)被檢測到熒光。
(3)核酸檢測的優(yōu)點是只需采集少量樣本即能準(zhǔn)確檢測,據(jù)圖分析可知,其原因是 少量樣本中的RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄和PCR后可獲得大量待測基因(DNA片段)
少量樣本中的RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄和PCR后可獲得大量待測基因(DNA片段)
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(4)在制備新冠病毒某特定抗原的單克隆抗體過程中,提取B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,兩次篩選的目的依次得 雜交瘤細(xì)胞、能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤
雜交瘤細(xì)胞、能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤
細(xì)胞。新冠單抗能準(zhǔn)確結(jié)合新冠病毒,是因為單克隆抗體具有的特點是 特異性強、靈敏度高、可大量制備
特異性強、靈敏度高、可大量制備
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