某興趣小組欲從一片樹林的土壤中取樣分離出分解纖維素的細(xì)菌,用于土壤中廢紙的降解實驗。實驗操作流程如圖所示。
土壤提取液培養(yǎng)基1剛果紅培養(yǎng)基培養(yǎng)液培養(yǎng)基2→計算種群密度
纖維素 |
NaNO3 |
MgSO4 |
KCl |
FeSO4 |
KH2PO4 |
蒸餾水 |
30g |
2g |
0.5g |
0.5g |
0.1g |
1g |
1000mL |
(1)興趣小組按上表成分并添加了瓊脂制成了培養(yǎng)基1,培養(yǎng)基中NaNO
3的作用是
提供氮源和無機鹽
提供氮源和無機鹽
;該培養(yǎng)基在實驗中的作用是
分離分解纖維素的細(xì)菌
分離分解纖維素的細(xì)菌
。
(2)實驗操作中有四次接種,每次接種需灼燒接種工具至少
兩
兩
次,以保證無菌操作。接種后的培養(yǎng)皿要倒置培養(yǎng),其目的是
減少水分蒸發(fā),防止污染
減少水分蒸發(fā),防止污染
。
(3)經(jīng)培養(yǎng)后培養(yǎng)基1上得到三種不同的菌落,用接種針接種到剛果紅培養(yǎng)基的不同位置,培養(yǎng)一段時間后得到如圖結(jié)果。應(yīng)選擇
①
①
處的菌落進行富集培養(yǎng),理由是
①處透明圈大,說明細(xì)菌分解纖維素的能力強
①處透明圈大,說明細(xì)菌分解纖維素的能力強
。
(4)取10mL富集培養(yǎng)后的菌液,加入90mL無菌水進行梯度稀釋,取0.1mL稀釋液涂布于培養(yǎng)基平板上。10
4倍稀釋度下對應(yīng)的三個平板菌落數(shù)分別為32、40和36,每毫升菌液中分解纖維素細(xì)菌的數(shù)量為
3.6×106
3.6×106
個。實驗結(jié)果統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低,原因是
當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落
當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落
。