當(dāng)前位置： 2022-2023學(xué)年河北省保定二十八中高二（上）調(diào)研生物試卷（1月份）> 試題詳情

研究人員利用綠色熒光蛋白基因（sGFP）轉(zhuǎn)染大麗輪枝菌，培育表達(dá)綠色熒光蛋白的轉(zhuǎn)基因菌株。主要過(guò)程如下（圖中a鏈和b鏈分別是相應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈）。
回答下列問(wèn)題：

（1）第①步：PCR擴(kuò)增sGFP基因。PCR擴(kuò)增sGFP的原理是
DNA雙鏈復(fù)制
DNA雙鏈復(fù)制
；圖中b鏈的堿基序列黏性末端為
AGCT
AGCT
。
（2）第②步：目的基因與運(yùn)載體結(jié)合。②需要的工具酶是
DNA連接酶
DNA連接酶
，此時(shí)目的基因插入到
構(gòu)巢曲霉
構(gòu)巢曲霉
啟動(dòng)子之后，目的是
保證sGFP基因可以在大麗輪枝菌細(xì)胞中表達(dá)
保證sGFP基因可以在大麗輪枝菌細(xì)胞中表達(dá)
。
（3）第③步：目的基因?qū)氪篼愝喼?。該過(guò)程需要先將目的基因?qū)朕r(nóng)桿菌，而后將轉(zhuǎn)化后的農(nóng)桿菌放置于含有的
潮霉素
潮霉素
培養(yǎng)基上，篩選出含有目的基因的農(nóng)桿菌。將導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌加入大麗輪枝菌的孢子細(xì)胞懸液中，在適宜條件下完成轉(zhuǎn)染后利用濾膜過(guò)濾得到孢子細(xì)胞，再在真菌培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得菌落，最終通過(guò)檢測(cè)
熒光強(qiáng)度
熒光強(qiáng)度
篩選出綠色熒光蛋白旺盛表達(dá)的大麗輪枝菌。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．

【答案】DNA雙鏈復(fù)制；AGCT；DNA連接酶；構(gòu)巢曲霉；保證sGFP基因可以在大麗輪枝菌細(xì)胞中表達(dá)；潮霉素；熒光強(qiáng)度

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/7/5 8:0:9組卷：0引用：1難度：0.6

相似題

1．利用基因工程生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖所示，下列敘述不正確的是（　?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/201711/197/1bd70dc0.png" style="vertical-align:middle" />

A．過(guò)程①是在小菜蛾細(xì)胞的細(xì)胞核中進(jìn)行

B．過(guò)程②獲取的CarE基因中不含有啟動(dòng)子

C．過(guò)程③進(jìn)行前需要用Ca²⁺處理大腸桿菌

D．過(guò)程④可以利用DNA分子雜交技術(shù)鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞

發(fā)布：2024/10/28 21:30:2組卷：25引用：2難度：0.7

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2．科學(xué)家對(duì)乳酸脫氫酶（LDH）進(jìn)行了改造，使其能夠高效地生產(chǎn)高純度的苯乳酸。回答下列有關(guān)問(wèn)題：
（1科學(xué)家改造乳酸脫氫酶時(shí)需要做的第一步是

。研究發(fā)現(xiàn)，要將LDH基因改造成為mLDH（改造后的乳酸脫氫酶）基因，需將LDH第52位的酪氨酸替換為亮氨酸，使得活性中心增大，才能用于生產(chǎn)苯乳酸。
①先將LDH基因片段連人載體中，形成環(huán)狀質(zhì)粒（如圖1）。

將突變后的序列設(shè)計(jì)在引物1中，以環(huán)狀質(zhì)粒為PCR的

，再向體系中加入四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、

，以及堿基替換了的引物擴(kuò)增LDH基因，PCR產(chǎn)物的序列便引入了預(yù)期的突變。
②上述PCR產(chǎn)物為鏈狀DNA分子，改造后的LDH基因序列位于PCR產(chǎn)物的兩側(cè)，需要用

酶將產(chǎn)物兩端連接，獲得含有mLDH基因的質(zhì)粒。
（2）產(chǎn)生苯乳酸的過(guò)程還需FDH酶參與。現(xiàn)需要構(gòu)建同時(shí)含有mLDH、FDH的基因表達(dá)載體。請(qǐng)你根據(jù)圖2，提出將兩個(gè)基因依次連入載體的思路：

（要體現(xiàn)選用的內(nèi)切酶和連接的先后順序）。

（3）上述科學(xué)實(shí)踐屬于生物工程中的

工程。在生命科學(xué)高速發(fā)展的今天，基因改造已十分成熟，但有一些紅線不能觸碰，請(qǐng)你舉出一例我國(guó)明令禁止的生物工程應(yīng)用：

。
發(fā)布：2024/10/28 17:0:2組卷：9引用：2難度：0.6
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3．我國(guó)科學(xué)家將人類的生長(zhǎng)激素（GH）基因?qū)膈庺~(yú)的受精卵，培育出能快速生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)。下列敘述錯(cuò)誤的是（　　）

A．轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)可以合成GH，說(shuō)明轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)和人共用一套遺傳密碼子

B．GH基因在轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)和人細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)過(guò)程均需要核糖體和線粒體參與

C．GH基因在轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)和人細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄時(shí)形成的堿基對(duì)種類不同

D．若替換轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)GH基因中的一個(gè)堿基對(duì)，則仍可能在其體內(nèi)檢測(cè)到GH

發(fā)布：2024/10/28 17:0:2組卷：9引用：2難度：0.7

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1．利用基因工程生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖所示，下列敘述不正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/201711/197/1bd70dc0.png" style="vertical-align:middle" />

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