人參皂苷Rh2是人參中重要的活性組分之一，具有抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等功能。我國(guó)科研人員以酵母菌為受體細(xì)胞，經(jīng)改造獲得Rh2前體物質(zhì)A高產(chǎn)的L菌株。科研人員對(duì)其繼續(xù)進(jìn)行基因工程改造，以期獲得人參皂苷Rh2高產(chǎn)的細(xì)胞工廠菌株。
（1）相比于植物細(xì)胞，選擇酵母菌作為受體細(xì)胞的主要優(yōu)勢(shì)是：
繁殖快、單細(xì)胞真核生物、細(xì)胞遺傳物質(zhì)相對(duì)較少、易培養(yǎng)、產(chǎn)物含量高、產(chǎn)物易分離
繁殖快、單細(xì)胞真核生物、細(xì)胞遺傳物質(zhì)相對(duì)較少、易培養(yǎng)、產(chǎn)物含量高、產(chǎn)物易分離
。
（2）前體物質(zhì)A可依次經(jīng)過P酶和N酶轉(zhuǎn)化為人參皂苷Rh2?？蒲腥藛T通過 PCR技術(shù)
PCR技術(shù)
方法獲得大量P和N基因片段，然后再用限制酶和 DNA連接
DNA連接
酶處理，將他們連接形成重組DNA片段。科研人員將基因編輯質(zhì)粒、引導(dǎo)序列質(zhì)粒和重組DNA片段導(dǎo)入L菌。據(jù)圖1分析，為初步篩選得到成功轉(zhuǎn)入兩種質(zhì)粒的受體菌，需要用 不含尿素和色氨酸
不含尿素和色氨酸
培養(yǎng)基。再通過分子水平技術(shù)確定重組DNA片段整合到L菌染色體上。
（3）科研人員篩選得到成功轉(zhuǎn)化的R菌株，將其與L菌株置于相同條件下培養(yǎng)，發(fā)酵一段時(shí)間后檢測(cè)人參皂苷Rh2和前體物質(zhì)A的含量，結(jié)果如圖2。據(jù)圖分析，R菌株能 能合成人參皂甙Rh2和前體物質(zhì)A
能合成人參皂甙Rh2和前體物質(zhì)A
。
（4）結(jié)合上述研究，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步提升R菌株生產(chǎn)能力的可行方案是 提取L菌的合成前體物質(zhì)A基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體并導(dǎo)入R菌內(nèi)，篩選人參皂甙Rh2和前體物質(zhì)A合成量都較高的目的R菌，然后擴(kuò)大培養(yǎng)
提取L菌的合成前體物質(zhì)A基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體并導(dǎo)入R菌內(nèi)，篩選人參皂甙Rh2和前體物質(zhì)A合成量都較高的目的R菌，然后擴(kuò)大培養(yǎng)
。
