[選修1:生物技術(shù)實(shí)踐]
甘肅某地由于TNT(主要成分為2,4-二硝基甲苯磺酸鹽)紅水蒸發(fā)池滲漏,對(duì)土壤造成嚴(yán)重污染,威脅到黃河上游的水質(zhì)安全。因此,TNT紅水污染土壤修復(fù)是目前亟待解決的環(huán)境問(wèn)題。某實(shí)驗(yàn)小組欲通過(guò)生物修復(fù)分離有效降解2,4-二硝基甲苯磺酸鹽的菌株,進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn),請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)LB培養(yǎng)基的制備:取胰蛋白胨、NaCl和酵母提取物溶于蒸餾水中,此過(guò)程中胰蛋白胨提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是
碳源和氮源
碳源和氮源
,用NaOH調(diào)節(jié)pH至7.2,用 高壓蒸汽滅菌鍋
高壓蒸汽滅菌鍋
在121℃條件下滅菌15分鐘。若要獲得本研究所用的固體培養(yǎng)基,需在上述培養(yǎng)基中加入 瓊脂
瓊脂
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(2)菌株分離與鑒定:取 甘肅某TNT紅水污染場(chǎng)地
甘肅某TNT紅水污染場(chǎng)地
土壤,放入裝有100mL無(wú)菌LB液體培養(yǎng)基的錐形瓶中,在30℃和120rpm的恒溫?fù)u床上振蕩24小時(shí),此過(guò)程的目的是 富集培養(yǎng)
富集培養(yǎng)
。取1mL培養(yǎng)液,采用 稀釋涂布平板
稀釋涂布平板
法分離純化菌株。
(3)該實(shí)驗(yàn)小組欲進(jìn)一步探究菌株對(duì)2,4-二硝基甲苯磺酸鹽的降解能力,請(qǐng)幫助設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路:取人工配制的一定濃度的2,4二硝基甲苯磺酸鹽(TNT)溶液加入錐形瓶中,之后再在錐形瓶中加入一定量的純化菌液每隔一定時(shí)間取樣,測(cè)定2,4二硝基甲苯磺酸鹽濃度
取人工配制的一定濃度的2,4二硝基甲苯磺酸鹽(TNT)溶液加入錐形瓶中,之后再在錐形瓶中加入一定量的純化菌液每隔一定時(shí)間取樣,測(cè)定2,4二硝基甲苯磺酸鹽濃度
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(4)探究鹽度對(duì)菌株生長(zhǎng)的影響研究發(fā)現(xiàn),純化的菌株在NaCl濃度為0%~3%之間對(duì)2,4-二硝基甲苯磺酸鹽的降解率在96小時(shí)后達(dá)到90%,但當(dāng)NaCl濃度達(dá)到5%后,降解率幾乎為0。研究中偶然發(fā)現(xiàn)菌株B1在NaCl濃度達(dá)到5%后,降解率卻達(dá)到50%,說(shuō)明 菌株B具有一定的耐鹽能力能在較高鹽濃度條件下降解2,4二硝基甲苯磺酸鹽
菌株B具有一定的耐鹽能力能在較高鹽濃度條件下降解2,4二硝基甲苯磺酸鹽
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