[選修3:現(xiàn)代生物科技專題]
新冠病毒是一種RNA病毒,感染率極高,由其引起的新冠肺炎在我國累計(jì)確診已超過400萬例。病毒的檢測在疫情防控中發(fā)揮重要作用?;卮鹣铝袉栴}:
(1)核酸檢測是篩查新冠病毒感染的重要方法。通過采集咽拭子等樣本,利用RT-PCR法擴(kuò)增病毒核酸,原理是以病毒ORFIab基因和N基因(核糖核苷酸序列)中的保守序列為靶點(diǎn),將RNA經(jīng)過
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
過程合成cDNA,再擴(kuò)增相應(yīng)的核酸片段。
(2)RT-PCR法僅擴(kuò)增ORFIab基因和N基因兩種片段,則PCR反應(yīng)體系中共需要加入 4
4
種引物。加入的引物需要滿足 耐高溫、能與模板鏈相結(jié)合
耐高溫、能與模板鏈相結(jié)合
的特點(diǎn)。
(3)病毒抗原檢測是早期診斷感染者的重要措施,病毒N蛋白是引發(fā)機(jī)體產(chǎn)生抗體的主要抗原。若利用N蛋白制備單克隆抗體,則需要用N蛋白免疫小鼠,目的是獲得獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞
獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞
。
(4)制備單克隆抗體過程中,細(xì)胞融合后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞外,融合的細(xì)胞有 B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的細(xì)胞
B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的細(xì)胞
三種類型。經(jīng)過篩選、檢測,體外培養(yǎng)收集單克隆抗體并制成檢測試劑盒。
(5)與常規(guī)的血清抗體檢測相比,用單克隆抗體檢測的顯著優(yōu)勢是 雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的單克隆抗體能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備
雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的單克隆抗體能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備
(答出兩點(diǎn))等。