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維生素A在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為11-順式視黃醛后,與視網(wǎng)膜特定細(xì)胞中的視蛋白結(jié)合成視紫紅質(zhì)。視紫紅質(zhì)接受光信號(hào)后,11-順式視黃醛轉(zhuǎn)變?yōu)槿词揭朁S醛,視紫紅質(zhì)構(gòu)象發(fā)生變化,激活細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,最終產(chǎn)生視覺。全反式視黃醛與視蛋白脫離,經(jīng)復(fù)雜的轉(zhuǎn)運(yùn)和酶促反應(yīng),再度轉(zhuǎn)變?yōu)?1-順式視黃醛而被重復(fù)利用。最新研究表明,一種G蛋白偶聯(lián)受體RGR可能參與了視覺產(chǎn)生的某些過程。為研究RGR的作用機(jī)理,某研究小組利用基因工程培育出含RGR反義基因(反義基因是通過原基因反向連接在載體的啟動(dòng)子和終止子之間,其轉(zhuǎn)錄出的mRNA與原基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA互補(bǔ)配對(duì))的轉(zhuǎn)基因小鼠(rgr),研究該基因的功能?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)為構(gòu)建RGR反義基因重組載體,需先設(shè)計(jì)引物,通過PCR技術(shù)特異性擴(kuò)增RGR反義基因。為使PCR產(chǎn)物能被限制酶切割,需在引物上添加相應(yīng)的限制酶識(shí)別序列,即在引物A的
5′端
5′端
(填“3′端”或“5′端”)添加
BamHⅠ
BamHⅠ
限制酶識(shí)別序列,在引物B添加
EcoRⅠ
EcoRⅠ
限制酶識(shí)別序列。
(2)培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因小鼠過程中,將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞常用的方法是
顯微注射法
顯微注射法
,常用的受體細(xì)胞是
受精卵
受精卵
,選擇培養(yǎng)基中除有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的必需成分,還需要添加
四環(huán)素
四環(huán)素
起篩選作用。
(3)研究人員將正常小鼠(WT)和轉(zhuǎn)基因小鼠(rgr)都平均分成兩組,一組在黑暗中飼養(yǎng)12h,另一組在光照下飼養(yǎng)12h;隨后測(cè)定小鼠眼睛中11-順式視黃醛、全反式視黃醛和視紫紅質(zhì)的含量,結(jié)果如圖3所示。據(jù)圖分析,光照條件下RGR的作用機(jī)理可能是
RGR通過促進(jìn)全反式視黃醛轉(zhuǎn)化為11-順式視黃醛,進(jìn)而增加視紫紅質(zhì)的形成
RGR通過促進(jìn)全反式視黃醛轉(zhuǎn)化為11-順式視黃醛,進(jìn)而增加視紫紅質(zhì)的形成
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】5′端;BamHⅠ;EcoRⅠ;顯微注射法;受精卵;四環(huán)素;RGR通過促進(jìn)全反式視黃醛轉(zhuǎn)化為11-順式視黃醛,進(jìn)而增加視紫紅質(zhì)的形成
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:15引用:3難度:0.6
相似題
  • 1.科研小組利用基因工程技術(shù)將“抗蟲基因”轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞成功培育出抗蟲棉,該技術(shù)所用的含“抗蟲基因”的DNA與質(zhì)粒上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示(不同限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn):BamHⅠ5′-GGATCC-3′,BclⅠ5′-TGATCA-3′,Sau3AⅠ5′-GATC-3′,HindⅢ5′-AAGCTT-3′)。請(qǐng)分析并回答以下問題:
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    (1)將抗蟲基因轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞前,可以通過PCR擴(kuò)增獲得大量抗蟲基因,PCR擴(kuò)增前應(yīng)根據(jù)
     
    設(shè)計(jì)引物。培育轉(zhuǎn)基因棉花的核心工作是
     
    。由圖1和圖2分析可知,研究人員應(yīng)選擇
     
    限制酶處理含抗蟲基因的DNA片段,在處理質(zhì)粒的時(shí)候應(yīng)選擇
     
    限制酶。
    (2)蛋白酶抑制劑基因也是一種抗蟲基因,某研究團(tuán)隊(duì)將胰蛋白酶抑制劑(NaPI)和胰凝乳蛋白酶抑制劑(StPin1A)的基因單獨(dú)或共同轉(zhuǎn)化,獲得轉(zhuǎn)基因植株。
    ①將抗蟲基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)時(shí),除了采用我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的花粉管通道法,還可以采用
     
    法,使用該方法時(shí),應(yīng)將抗蟲基因插入到質(zhì)粒的
     
    區(qū)域。
    ②標(biāo)記基因可用于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入,由圖2可知,應(yīng)選含有
     
    的培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的細(xì)胞。為了檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中是否穩(wěn)定表達(dá),在分子水平上的檢測(cè)方法為
     
    。
    ③圖3為將胰蛋白酶抑制劑(NaPI)和胰凝乳蛋白酶抑制劑(StPin1A)的基因單獨(dú)或共同轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,據(jù)結(jié)果分析,
     
    (選填“NaPI”或“StpinlA”或“NaPI+StpinlA”)轉(zhuǎn)基因棉花的抗蟲效果最佳,得出該結(jié)論的原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/11/19 5:30:2組卷:38引用:2難度:0.5
  • 2.某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列,并運(yùn)用交錯(cuò)延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲性能強(qiáng)的重組B基因,轉(zhuǎn)入煙草獲得成功,過程如圖所示。下列選項(xiàng)正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)
    注:①交錯(cuò)延伸PCR:基因Bt1和Bt2均作為模板,所需引物相同,圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動(dòng)子Pr1a可在煙草葉肉細(xì)胞中特異性啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。③圖中生長(zhǎng)素合成酶基因是通過成熟mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA片段,可使植物細(xì)胞合成生長(zhǎng)素。

    發(fā)布:2024/11/16 21:0:1組卷:36引用:2難度:0.5
  • 3.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
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